Tc标记的ND1重组单链抗体在荷人结肠癌裸鼠体内分布及放射免疫显像研究

摘要

目的:探讨<'99>Tc<'m>标记的ND1重组单链抗体(single-chain fragment variable,scFv)在荷人结肠癌裸鼠模型体内的分布及放射免疫显像.方法:1.ND1重组scFv的制备和纯化.ND1重组scFv由中国医科大学细胞生物教研室研制.经鉴定为IgG<,1>,ELISA检测免疫活性,证明其对结肠癌有较高的亲和性.测抗体浓度为1.5mg/ml,备用.2.荷人结肠癌裸鼠模型的建立.纯系BALB/c4~6周龄雌性裸鼠18只,平均体重为20~30g.将人体大肠癌细胞系CCL-187 1×10<'7>接种于背部皮下,饲养于SPF级动物房,待4周后,肿瘤直径长至0.5~1.0cm时用于实验.3.抗体的标记及标记率的测定.抗体采用<'99>Tc<'m>预亚锡直接标记法标记,用纸层析法测定标记率.4.标记抗体在荷人结肠癌裸鼠体内的分布.将荷人结肠癌裸鼠18只随机分为2组,其中一组裸鼠再分为3组,每组3只,腹腔注射<'99>Tc<'m>-ND1重组scFv 1850KBq,使用SPECT仪,配以低能平行孔高分辨准直器,采集计数为200K.分别于抗体注射后1h、3h、8h进行放射免疫显像.于每一时相显像后立即断颈处死动物,取眼球后血、肝、脾、胃、大肠、后大腿骨骼、肌肉、肺、心脏及肿瘤组织,用γ放免计数仪测定放射性计数,计算T/NT值.另一组荷人结肠癌裸鼠9只分为3组,每组3只,尾静脉注入<'99>Tc<'m>-ND1重组scFv 1850KBq,抗体注射后1h、3h、8h每一时相立即断颈处死动物,取肿瘤组织及大肠,用γ放免计数仪测定放射性计数,计算T/NT值.5.统计学处理.数据以x±s表示,并行t检验.结论:<'99>Tc<'m>-ND1重组scFv对结肠癌具有良好的亲和力,可望作为结肠癌诊断、预后判定的导向载体.并为临床早期特异性诊断结肠肿瘤提供新的有效手段.

目录

英文缩略语

前 言

材料和方法

实验结果

讨 论

结 论

本研究新见解

参考文献

致 谢

综 述 放射性核素标记的单克隆抗体在大肠癌显像中的应用进展

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