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大鼠体内气管损伤修复过程中气管干细胞定位及Shh动态变化的研究

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论文一大鼠体内气管损伤修复过程中气管干细胞的定位研究

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材料和方法

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论文二气管干细胞增殖分化过程中S¨信号通路的动态变化

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本研究创新性的自我评价

参考文献

综 述气管上皮细胞移植模型的建立及应用

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摘要

研究通过应用氟尿嘧啶(5-FU)建立大鼠体内气管损伤修复模型,使用流式细胞仪分离出的侧群(SP)细胞。采用光镜、免疫组化、荧光染色等方法,观察气管上皮修复过程并对干细胞加以定位研究;采用免疫荧光及RT-PCR方法对气管干细胞中ABCG2在蛋白及mRNA水平的表达加以研究。并通过半定量RT-PCR法动态观察了气管干细胞增殖分化过程中Shh信号传导通路的变化。 研究表明:1.发现5-FU作用后气管上皮剩余的G0期细胞中存在着干细胞,正是由于这些干细胞的增殖分化,气管上皮才得以修复。2.大鼠气管干细胞性状分析:是对5-FU有抗性的、PCNA染色阴性、处于G0期、形态上未分化的细胞。3.5-FU作用后,免疫荧光检测显示ABCG2阳性细胞增多,RT-PCR可见ABCG2/Bcrp1表达,由于以往研究表明ABCG2/Bcrp1可作为确定SP干细胞的表型标记,故进一步证实5-FU作用后残留的G0期细胞中含有干细胞。4.正常组织、5-FU作用30min时及损伤修复后接近正常的组织中无Shh信号表达,而在修复过程中Shh存在动态变化,说明Shh传导通路参与了气管干细胞的增殖分化过程。 5.该研究为肺癌的组织发生及气管干细胞临床应用奠定了重要基础。

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