CyclinG1、G2蛋白表达与卵巢浆液性囊腺癌的相关性研究

摘要

前言：细胞周期蛋白是真核细胞周期循环中主要的调节因子，在人类肿瘤细胞中已经发现多种细胞周期蛋白的异常表达。CyclinG是细胞周期蛋白家族中发现较晚的新成员，cyclinG1和cyclinG2在结构上具有高度同源性，但在功能上似乎各自发挥着其特有的生物学功能。本实验应用免疫组化(S-P)方法检测cyclinG1、G2蛋白在32例卵巢浆液性囊腺癌和26例卵巢浆液性囊腺瘤组织中的表达情况，探讨cyclinG1、G2蛋白表达与卵巢浆液性囊腺癌的可能相关性。 材料与方法1.标本：32例卵巢浆液性囊腺癌和26例卵巢浆液性囊腺瘤组织标本来自中国医科大学附属第一医院妇科，经病理切片确诊。 2.免疫组化染色：免疫组化(S-P)法，以细胞核和/或胞浆呈棕黄色染色为阳性表达，在高倍显微镜下计数100个细胞，阴性结果为染色细胞数＜5％。 3.统计学分析：所得数据应用χ2检验进行统计学分析。 结果免疫组化染色结果：cyclinG1蛋白表达阳性部位位于细胞核，而cy-clinG2位于细胞核和胞浆中。在卵巢浆液性囊腺癌和卵巢浆液性囊腺瘤中cyclinG1蛋白表达阳性百分比分别为84.38％(27/32)和30.77％(8/26)；cyclinG2分别为21.88％(7/32)和61.54％(16/26)。统计学分析结果提示cyclinG1、cyclinG2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌及卵巢浆液性囊腺瘤中表达差异均具有统计学意义(p＜0.01)，可见cyclinG1蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中表达增高，而cyclinG2蛋白表达减低。 讨论CyclinG1基因由Tamura等于1993年发现，定位于5q32-34，第一个内含子中有p53蛋白结合位点。CyclinG1蛋白主要定位于细胞核，目前研究表明在骨胳肌中表达水平最高，其次在卵巢、肾脏和结肠组织中也有较高水平的表达。但cyclinG1并非为细胞增殖负性调节因子。在部分骨肉瘤中cyclinG1呈高表达，cyclinG1反义RNA表达减缓骨肉瘤细胞增殖，有促进细胞增长作用。此外，Smith等将cyclinG1cDNA导入人大肠癌细胞和正常人成纤维细胞，发现cyclinG1表达促进细胞增殖。 本实验结果显示cyclinG1蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织中表达增高，差异具有统计学意义。CyclinG1的持续性高水平表达，对p53的转录活性反应迟钝。过多的cyclinG1通过与PP2A结合使MDM2去磷酸化，促进MDM2介导的p53泛素化，加速p53的降解，从而表现为对p53的负反馈作用，抑制细胞的凋亡，导致肿瘤细胞无限制增长。CyclinG1蛋白的改变可能与卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展密切相关。应用顺铂、阿霉素等药物处理细胞后发现G2/M期阻滞的细胞比例与cyclinG1的表达明显正相关，推测cyclinG1可能与细胞周期G2/M检查点调控有关。CyclinG1过表达的细胞对顺铂、阿霉素等药物的细胞毒性更加敏感，可用于卵巢癌化疗药物筛选。 Horne等首先报道了cyclinG2基因克隆，其蛋白主要定位在细胞质中。Bates等的研究表明cyclinG1和cyclinG2的mRNA表达都能被DNA损伤药物放线菌素D诱导，不同的是对cyclinG2的诱导表达呈p53非依赖性。当B细胞的增殖受抑制或发生细胞周期阻滞时，cyclinG2转录水平上调。Wykoff等将抑癌基因VHL重新导入已存在该基因缺陷的肾癌细胞，发现转基因诱导表达的一系列靶基因中包括cyclinG2。KimY等在人口腔癌中检测到cyclinG2基因表达的减低。刘洁等应用腺病毒载体转染胃腺癌细胞系SGC-7901，cyclinG2基因抑制其增殖作用。本研究中cyclinG2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中表达减低，与上述研究结果一致，均表明cyclinG2可能是细胞周期的负性调控因子。卵巢浆液性囊腺癌中cyclinG2蛋白表达减低提示其可能与卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展机制相关。 结论：1.卵巢浆液性囊腺癌中cyclinG1蛋白表达增高提示其可能与卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展机制相关，并可用于卵巢浆液性囊腺癌化疗药物筛选。 2.卵巢浆液性囊腺癌中cyclinG2蛋白表达减低提示其可能与卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展机制相关。

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综 述细胞周期蛋白G家族的研究

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