Ang-1和Ang-2在胃癌组织中的表达和临床病理特征的关系

摘要

目的:
　　 肿瘤血管是为肿瘤细胞输送氧及营养物质的通道，也是实现肿瘤转移的重要通道之一。血管生成素是与血管新生密切相关的一类血管生长调节因子，该家族目前已发现的四个成员Ang-1，2，3，4。Ang-2和Ang-1可与血管内皮特异性的酪氨酸激酶受体(Tie-2)同一部位结合，Ang-2通过竞争性的抑制Ang-1的生物功能，降低了血管的稳定性，继而导致了高度不稳定性、不成熟性。说明Ang-1和Ang-2表达的不平衡，可能在肿瘤的血管生成中起着至关重要的作用。
　　 目前已发现Ang-1和Ang-2在多种肿瘤组织有表达，本实验应用免疫组化技术对胃癌组织及正常对照组织中表达情况进行了检测，并分析结果，旨在探讨Ang-1和Ang-2在胃癌发生发展中的作用。
　　 实验材料:
　　 1、研究对象
　　 选择临床及病理资料齐全的存档胃腺癌蜡块标本54例，按各临床病理因素分组，另取正常胃粘膜标本15例作对照。全部病术前均未行过化疗或放疗，病理均证实为腺癌。
　　 2、主要试剂与仪器SP试剂盒及DAB显色试剂盒，免疫组织化学染色所需的常规试剂与仪器，鼠抗人Ang-1、Ang-2单克隆抗体。
　　 实验方法:
　　 将蜡块切片HE染色，确定标本组织分化程度。采用SP免疫组化方法检测Ang-1、Ang-2在胃癌及正常胃组织中的表达。以细胞内出现明显棕黄色颗粒为阳性细胞，按其占同类计数细胞的百分比、染色强度统计结果。所得数据采用x<'2>检验，P<0.05为差异显著标准。
　　 实验结果:
　　 1、胃癌组织及正常的胃粘膜组织中Ang-1和Ang-2的表达。
　　 Ang-1和Ang-2蛋白染色阳性反应信号呈棕黄色细小颗粒，于癌细胞及血管内皮细胞质内。胃癌组织Ang-2蛋白表达阳性率72.2％(39/54)，胃粘膜正常组织Ang-2蛋白表达阳性率33.3％(5/15)。结果表明，Ang-2蛋白在胃癌组织中表达较正常组织高，两者差异显著(P<0.01)。胃癌组织Ang-1蛋白表达阳性率29.6％(16/54)，胃粘膜正常组织Ang-1蛋白表达阳性率73.3％(11/15)，结果表明Ang-1蛋白在正常组织中表达较胃癌组织高，两者差异显著(P<0.01)。
　　 2、Ang-2蛋白表达与胃癌临床特征的关系。
　　 Ang-2蛋白表达水平与患者性别、年龄及癌的体积、淋巴结转移、浸润深度无关(P>0.05)，与血道转移、胃癌分化程度及临床分期相关．高中分化腺癌中Ang-2表达明显低于低分化腺癌(P<0.05)，Ⅳ期明显高于Ⅰ期(P<0.01)。
　　 讨论:
　　 原发性胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率高达25.53％，占恶性肿瘤全部死亡的23.93％，其中肿瘤的侵润和转移是患者的主要死因，其浸润和转移是一个多步骤、多阶段和多因素参与的复杂过程，是影响胃癌患者预后的主要因素。
　　 血管生成素家族是近年来发现的一个既含受体激动剂又含受体抑制剂的促血管生成家族，现已发现4个成员：Ang-1、Ang-2、Ang-3、Ang-4，均能识别内皮细胞特异性酪氨酸酶受体Tie-2，但效应迥然不同。Ang-1、Ang-2分别位于人类染色体的8q22.3-q23及8p23.1，编码的产物均为糖蛋白，分子量约为75ku，有60％的同源性。
　　 目前研究认为Ang-1的表达与肿瘤血管形成的多少关系不大，Ang-1通过激活Tie-2促进内皮细胞的生存、趋化，稳定血管，防止渗漏；Ang-2蛋白为分泌型糖蛋白，Ang-2通过抑制Tie-2的活化参与血管的重塑和内膜的去稳定作用。Ang-2与受体结合可导致后者脱磷酸化，阻断血管内皮细胞和血管周细胞的结合，从而引起血管结构的不稳定。目前对Ang-1、Ang-2的研究较深入，尤其是Ang-2，在肿瘤组织中的表达明显高于周围正常组织，参与肿瘤新生血管的形成、延续，影响肿瘤的生长、转移。目前研究认为Ang-1的表达与肿瘤血管形成的多少关系不大，而Ang-2表达与肿瘤血管形成数目、临床分期和预后关系密切。目前已发现Ang-2在多种肿瘤组织有表达，我们应用免疫组化技术对54例胃癌组织及胃粘膜正常组织中Ang-1和Ang-2蛋白表达情况进行了检测，结果表明Ang-2在胃癌组织呈现过表达，与正常组织相比具有显著差异性(P<0.01)，提示Ang-2可能在胃癌的发生发展中起着重要作用。Ang-1蛋白在正常组织中表达较正常胃癌组织高，两者差异显著(P<0.01)，进一步证明Ang-1的表达与肿瘤血管形成的多少关系不大，Ang-2与Ang-1竞争性结合内皮细胞的Tie-2受体，诱导内皮细胞分裂、移位，使新生血管呈非出芽式生长。Lobov IB等报道，早期肿瘤组织中Ang-2与Ang-1水平相似，随着肿瘤体积增大，Ang-2浓度明显高于Ang-1。在肿瘤组织中，Ang-2与Ang-1竞争性结合Tie-2受体，主要表现为2种形式：①Ang-2结合内皮细胞上的Tie-2，阻断Ang-1引导Tie-2受体的磷酸化作用：②肿瘤组织中Ang-2过表达和Ang-1表达下调，破坏血管生成调节因子的平衡，2种作用形式共同参与肿瘤血管生成。血道转移胃癌Ang-2表达水平高于无血道转移者(P<0.05)，Ang-2表达水平与分期相关，Ⅳ期明显高于Ⅰ期(P<0.01)，提示Ang-2的过表达可促进癌组织血道转移，影响着胃癌的发展及预后。另外，Ang-2表达水平越高，癌组织分化程度越低(P<0.01)，提示Ang-2可能增加癌细胞的增殖能力。因此，Ang-2蛋白表达水平，有可能成为判断胃癌的恶性程度及患者的预后的指标。总之，通过研究Ang-2蛋白与胃癌侵袭、进展、转移行为间的关系，有助于我们更进一步了解胃癌生长转移机制，随着研究的不断深入，今后可尝试利用基因工程构建Ang-1或Ang-2的类似物，造成Ang-1和Ang-2表达的失衡，从而干扰肿瘤性血管的有效生成，抑制肿瘤的生长，可开辟一条治疗肿瘤的新路径。
　　 结论:
　　 1．Ang-2在胃癌组织高表达，Ang-1在正常的胃粘膜组织中高表达，胃癌组织中低表达。提示Ang-2参与肿瘤新生血管的形成、延续影响肿瘤的生长、转移。
　　 2．胃癌组织中Ang-2的表达率与肿瘤远隔转移、临床分期、密切相关，提示Ang-2可能在胃癌的侵袭、进展及转移播散中发挥重要作用。

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综述：血管生成素-2的研究现状

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