黄芪对EAE鼠脑内源性神经干细胞增殖分化的影响

摘要

目的: 实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)急性型是研究急性散播性脑脊髓炎(ADEM)发病机制及治疗的理想动物模型。本实验以急性EAE为模型，依据中医脑髓学说，气血相关理论，借助益气活血法，用黄芪治疗，通过检测黄芪对EAE神经干细胞增殖、分化表达水平的影响来探讨黄芪在EAE脑损伤修复中的作用。 方法: 1、以豚鼠脑脊髓匀浆加完全福氏佐剂作为抗原，给予Wistar大鼠四足垫皮内注射，建立EAE模型。 2、用黄芪药物治疗EAE大鼠，观察其促神经干细胞增殖效应和诱导分化效应，用神经干细胞的特异性巢蛋白多克隆抗体(神经上皮干细胞蛋白Nestin)、增殖细胞单克隆抗体(5-溴脱氧尿嘧啶BrdU)、神经细胞的特异性抗体(神经元特异性烯醇化酶NSE)鉴定神经干细胞的自我更新增殖能力和向神经元方向分化潜能。 3、将EAE模型随机分为模型组和治疗组，在相应时间点进行神经损伤体征评分，在EAE造模第7d以及发病后7d、14d、21d不同时间点，应用免疫组化技术，进行Nestin、BrdU、NSE分析比较各组大鼠脑组织中免疫阳性细胞的表达情况。 结果: 1、黄芪治疗组能改善神经功能损伤体征的评分。 2、EAE造模后，Nestin、BrdU在不同时间点在不同脑区出现程度不等的表达。与模型组比较，治疗组Nestin、Brdu免疫阳性细胞表达明显增强，于发病后7d、14d组促进Nestin、BrdU的表达作用显著，于造模7d未发病组，发病后21d组两组间无显著差异。 3、EAE后，NSE在不同时间点在不同脑区出现不同程度的表达。与模型组比较，治疗组NSE免疫阳性细胞表达明显增强，于EAE发病7 d、14 d组促进NSE的表达作用显著，于造模第7d未发病组，发病后21d组两组间无显著差异。 结论: EAE模型建立方法稳定、可靠。EAE发病后，Nestin、BrdU表达显著增强，表明神经干细胞、神经前体细胞在EAE大鼠脑中有增殖，NSE表达显著增强，表明神经干细胞在EAE大鼠脑损伤后有向神经元方向分化。黄芪治疗能够改善EAE大鼠神经功能损伤的作用以及促进神经干细胞增殖、向神经元方向分化的作用。

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综述：EAE相关的神经干细胞研究进展

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