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香菇多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞表型和功能的影响

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实验材料和方法

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本研究创新性的自我评价

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综述 香菇多糖的研究进展

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摘要

前言:
  1969年Chihara等首次从香菇中分离出具有抗肿瘤活性的多糖,香菇多糖(Lentinan,LNT)。香菇多糖具有多种药理学作用,是一种兼有抑制肿瘤和提高免疫功能的多糖类生物反应调节剂。香菇多糖可以增强巨噬细胞的吞噬功能;激活T淋巴细胞释放活化因子;提高NK细胞活性;诱导干扰素或白细胞介素等细胞因子的产生。树突状细胞(dendritic cells,DCs)是体内功能最强大的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),具有独特的抗原递呈和激活功能;它可以特异捕捉抗原,表达高水平的细胞内主要组织相容抗原MHC-Ⅱ(MHC-Ⅱ)类分子和协同刺激分子CD80和CD86,并能移行至淋巴器官,刺激初始型T细胞增殖活化,同时刺激B淋巴细胞增殖成熟。DCs作为免疫反应的核心和关键,在肿瘤细胞和T淋巴细胞的相互作用中起桥梁和枢纽作用。所以人们越来越热衷于有关DCs的研究,尤其是在肿瘤方面的应用。鉴于LNT在免疫系统中的显著调节作用,所以研究LNT对DCs的作用对于阐明LNT对免疫系统作用机理十分必要。本研究就LNT对小鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中表型及功能变化的影响作用进行探讨。
  方法:
  本实验采用小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow dendritic cells,BMDCs)进行实验,采集小鼠骨髓,诱导培养成树突状细胞。将小鼠骨髓来源树突状细胞分成LPS阳性对照组,LNT处理组和RPMI1640空白对照组,应用酸性磷酸酶活性检测技术、流式细胞仪检测技术、吞噬实验、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组BMDCs表型和功能的各种指标。
  结果:
  1.LNT处理组和LPS组BMDCs酸性磷酸酶活性均低于RPMI1640组;
  2.LNT组和LPS组相似,可上调BMDCs表面MHCⅡ、CD40、CD83、CD80、CD86和DEC205的表达;
  3.LNT处理组和LPS组BMDCs吞噬能力比RPMI1640空白对照组明显下降;
  4.ELISA结果显示1640组BMDCs的IL-12p70和TNF-a分泌较少,LNT组和LPS组BMDCs高分泌IL-12p70和TNF-a。
  结论:
  1.适宜浓度的LNT可以刺激DCs表型和功能的成熟。
  2.适宜浓度的LNT作用使DCs细胞内的酸性磷酸酶活性下降、减低DCs细胞对FITC-dextran的吞噬能力,表明DCs吞噬抗原能力下降,递呈能力增加,趋向成熟。
  3.适宜浓度的LNT显著增加DCs的MHCⅡ、CD40、CD83、CD80、CD86和DEC205分子的表达,刺激DCs发育成熟。
  4.适宜浓度的LNT显著增加培养上清中IL-12p70和TNF-a的含量,说明LNT促进DCs成熟的同时,上调DCs的功能。

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