20(S)-人参皂甙Rg3通过PI3K/Akt信号转导通路诱导人白血病细胞凋亡的实验研究

摘要

目的：
　　白血病是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病，又称“血癌”，该病居年轻人恶性疾病的首位。近年来，我国白血病的发病率正在持续上升。当前白血病的治疗方法主要是化疗。但严重的药物毒副反应及耐药，使其临床应用受到限制。近年来，中药因毒副作用小且疗效肯定等优势逐渐受到重视。因此，在中药中寻找白血病化疗辅助药物成为热点。20(s)-人参皂甙Rg3(20(S)-Ginsenoside Rg3，20(S)-GS-Rg3)是人参的生物活性成分，它是三萜皂甙混合物，具有多种生物活性，可用于预防和治疗胃癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、卵巢癌和结肠癌等恶性肿瘤。本研究旨在探讨20(s)-人参皂甙Rg3诱导人白血病细胞U937、HL-60细胞凋亡的分子机制，为20(s)-人参皂甙Rg3治疗人白血病提供实验和理论依据。
　　方法:
　　(1)采用台盼蓝染色检测细胞存活率;
　　(2)采用Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪分析U937、HL-60细胞的凋亡率;
　　(3)采用Western blot技术检测P-和anti-P-Akt、mTOR、p70S6K、4E-BP1和GSK-3β等蛋白的表达;
　　(4)采用荧光分光光度计分析技术检测caspase-3、caspase-9活性。
　　结果：
　　(1)台盼蓝染色结果显示:随着20(s)-人参皂甙Rg3浓度的增加及作用时间的延长，各实验组染成蓝色的细胞逐渐增多，提示坏死细胞逐渐增多，对照组则无变化。
　　(2)Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪检测结果显示:U937、HL-60细胞凋亡百分率随着20(s)-人参皂甙Rg3作用时间的延长而升高。
　　(3)Western blot分析结果显示:随着20(s)-人参皂甙Rg3作用时间逐渐延长，P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1、P-GSK-3β、P-p70S6K蛋白的表达逐渐减弱且呈时间依赖性;而总的Akt、mTOR、4E-BP1、GSK-3β和p70S6K蛋白的表达不变。
　　(4)荧光分光光度计分析结果显示:随着20(S)-人参皂甙Rg3作用时间的延长，caspase-3、caspase-9活性逐渐增强。
　　结论：
　　20(S)-人参皂甙Rg3能够诱导U937、HL-60细胞凋亡，并具有时间及剂量依赖性，其作用机制与P-Akt、P-mTOR、P-4E-BP1、P-GSK-3β、P-p70S6K蛋白表达下调及caspase-3、caspase-9活性增强有关。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

实验材料和方法

实验结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 人参皂甙Rg3诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究

在学期间科研成绩

致谢

个人简介