TNF-α对听觉恐惧条件反射功能的影响及相关机制

摘要

前言：
　　在炎症感染过程中，免疫细胞产生大量的促炎因子，作用于大脑引起认知功能障碍。肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor alpha，TNF-α)是重要的促炎因子之一。狼疮脑病（Lupus Encephalopathy，LE）患者脑脊液中的TNF-α水平显著增高，TNF-α可能在LE中扮演着重要角色，TNF-α在LE中的作用机制也越来越受到关注。
　　大脑记忆的形成是突触可塑性的过程，大量文献报道TNF-α对学习和记忆产生不利影响。在生理条件下，谷氨酸对突触可塑性、学习和发育是非常重要的，过多的谷氨酸诱发神经兴奋性中毒，并与多种中枢神经系统疾病的病理过程相关。TNF-α促进星形胶质细胞和小胶质细胞释放谷氨酸，过量的谷氨酸释放，通过过度刺激神经元上的门冬氨酸受体(NMDAR)发挥其神经毒性作用。因此，过量的谷氨酸引起的神经毒性可能就是TNF-α引起学习和记忆能力障碍的机制。应用MK-801阻断NMDAR，进而控制谷氨酸转运可能是一个潜在的治疗炎症诱导的脑部疾病的方向。TNF-α在狼疮脑病中的作用机制尚不明确，中枢神经系统受累所引起的神经精神症状（认知功能障碍）可能与TNF-α相关。
　　本研究以Wistar大鼠为实验动物，采用条件恐惧反射实验、高效液相色谱和免疫荧光染色等方法，探讨TNF-α及相关拮抗剂如何影响大鼠中枢神经系统的认知功能及大鼠杏仁核中的谷氨酸水平，胶质细胞活化情况。
　　目的：
　　明确大鼠杏仁核注射TNF-α对学习记忆能力的影响，探讨注射TNF-α对脑内谷氨酸水平变化的影响及神经胶质细胞是否活化，以及阻断谷氨酸信号传导通路可否缓解TNF-α所诱发的行为功能改变。
　　方法：
　　100只大鼠随机分成两组，实验组杏仁核内微量给予不同浓度的TNF-α，对照组予等量对照液。采用恐惧条件反射实验检测大鼠的行为学指标。实验后取材，用高效液相色谱法及免疫组化染色，对比两组杏仁核内谷氨酸水平变化及胶质细胞活化情况。并予MK-801提前注射阻断TNF-α，检测大鼠的行为学变化。
　　结果：
　　1、听觉恐惧条件反射
　　习惯化实验中，所有组的大鼠表现出低水平的僵直时间，差异无统计学意义（p＞0.05）;条件性实验中，对照组僵直时间比显著高于实验组，差异有统计学意义(p＜0.01);消退实验中，实验组僵立时间比较对照组显著增加(p＜0.01)。
　　2、TNF-α注射对杏仁核区的GABA和谷氨酸水平的影响
　　两组杏仁核区的GABA水平无显著差异（p＞0.05）。相反，谷氨酸水平差异显著，有统计学意义(p＜0.01)，但对比3个不同浓度的TNF-α实验组无显著性差异（p＞0.05）。
　　3、阻断NMDA受体可以缓解因TNF-α引起的恐惧学习障碍
　　MK-801+TNF-α组僵直时间比在条件实验中显著高于PBS+TNF-α组，而在消退实验中却较低，差异有统计学意义(p＜0.01)。MK-801+TNF-α和MK-801组在两个实验中差异无统计学意义（p＞0.05）。
　　结论：
　　大鼠杏仁核内注入TNF-α引起听觉恐惧条件反射的建立和消退时间明显延迟，大鼠学习记忆能力下降。经TNF-α处理后的大鼠杏仁核中的谷氨酸水平也升高，胶质细胞广泛活化。这表明，过量的TNF-α可以激活神经胶质细胞分泌大量谷氨酸，对神经元产生毒性作用，从而引起学习和记忆功能障碍，在TNF-α处理前，给予MK-801阻断谷氨酸传导信号有效缓解TNF-α所诱导的学习记忆能力损伤。

目录

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摘要

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材料和方法

结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 肿瘤坏死因子-α对的恐惧条件反射功能的影响

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