肺腺癌驱动基因EGFR、ALK及C-Met的分子表型与临床病理特征相关性的初步探讨研究

摘要

目的：
　　肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，居所有癌症病死率首位，其中80％左右为非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer，NSCLC)，而肺腺癌是其主要的病理亚型。多数患者确诊时已属晚期，失去了手术治疗的机会，而目前的化疗方案治疗效果已进入瓶颈期。近年来随着基因组学的发展及精准医学的提出，针对特定基因的分子靶向治疗已经成为治疗进展期NSCLC的重要策略。目前，多项大型临床研究数据显示，针对表皮生长因子受体(epidermal growth factorreceptor，EGFR)突变阳性患者，表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermalgrowth factor receptor-tyrosine kinases inhibitor，TKI)作为一线用药与传统的铂类化疗方案相比可明显延长无进展生存期（Progression free survival，PFS），改善患者生活质量，并且副作用明显减少。部分研究显示针对ALK基因融合的靶向药物治疗ALK基因融合阳性的患者获得了良好的疗效。近年来，相关研究显示间质表皮转化因子(Mesenchymmal-epithelial transition Factor，Met)扩增为EGFR-TKI耐药机制之一，c-Met扩增的患者服用针对c-Met扩增的靶向药物后生存质量及总生存期(Overall survival，OS)可以得到改善，因而对每个NSCLC患者检测这些可能的分子靶点，并总结其各自的临床特点，进行个体化靶向治疗显得尤其重要。本研究旨在探讨肺腺癌组织EGFR基因突变、ALK基因融合及c-Met蛋白表达与患者临床病理特征的相关性。
　　方法：
　　1、选取了2013年9月至2015年9月由中国医科大学附属盛京医院病理科组织学诊断为肺腺癌的组织标本147例。查阅病历统计患者的临床资料包括年龄、性别、分化程度、TNM分期（根据国际第七版肺癌的TNM分类标准）。
　　2、应用ARMS法Real-time PCR检测上述所选标本EGFR基因的突变情况。
　　3、从上述进行了EGFR基因检测的组织标本中选取76例应用IHC检测c-Met蛋白的表达情况，其中55例应用FISH检测c-Met扩增情况。
　　4、选取上述进行了c-Met蛋白检测而EGFR突变阴性的33例手术标本及2例FISH检测c-Met扩增异常的穿刺标本（1例扩增1例拷贝值大于4），应用ARMS法Real-time PCR与IHC检测其ALK基因融合及蛋白表达的情况。
　　结果：
　　1、147例肺腺癌组织标本EGFR突变的阳性率为53.7％(79/147)，其中第19位点缺失突变27例，第21位点L858R突变42例;EGFR突变与患者的性别(P=0.005)及肺癌的分化程度(P=0.006)具有显著的相关性，女性高于男性;分化越高，突变率越高。EGFR基因的突变与患者的年龄、肿瘤大小、淋巴转移及TNM分期不具有显著的相关性。
　　2、76例肺腺癌组织标本c-Met蛋白表达与肺癌的分化程度(P=0.01)具有显著相关性，在低分化组织较高。55例肺腺癌组织标本c-Met扩增率为1.8％(1/55)。
　　3、Real-time PCR检测35例EGFR突变阴性病例的ALK基因融合率为22.9％(8/35)，ALK基因融合与肺癌的分化程度(P=0.026)具有显著的相关性，低分化组织ALK基因融合率较高。用IHC方法检测了35例肺腺癌组织ALK蛋白表达，其结果为3(+)4例;2(+)15例;1(+)5例及0(-)11例，与Real timePCR的检测结果有较高的符合率。
　　结论：
　　1、肺腺癌EGFR突变的阳性率为53.7％，在女性高分化的肺癌中较多见;EGFR耐药突变与敏感突变可以共存。
　　2、ALK基因融合在EGFR突变阴性患者中的阳性率可达22.9％，低分化腺癌的患者中较多见，IHC可以作为ALK基因分子检测的筛选方法。
　　3、c-Met蛋白表达阳性在低分化腺癌的患者较多，与EGFR突变与否无关，而在ALK基因融合阳性组中c-Met蛋白表达高于ALK阴性组。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

材料与方法

一、材料

二、实验方法

三、统计学分析

实验结果

一、EGFR突变的阳性率及其与临床病理特征的相关性分析

二、c-Met蛋白表达、基因扩增与患者的临床病理特征的相关性分析

三、ALK基因融合、蛋白表达与患者临床病理特征的相关性分析

四、c-Met的蛋白表达与EGFR基因突变的相关性分析

五、c-Met蛋白表达与ALK基因融合的相关性分析

讨论

一、肺腺癌组织EGFR基因突变

二、肺腺癌组织c-Met蛋白高表达及c-Met扩增(或拷贝值异常)

三、肺腺癌组织ALK基因融合及检测方法选择

四、肺腺癌组织c-Met与ALK基因融合

五、肺腺癌组织c-Met与EGFR基因突变

结论

本研究创新性自我评价

参考文献

综述 非小细胞肺癌的生物治疗靶点c-Met的研究进展

致谢

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