AG490通过调节Th17/Treg平衡缓解DSS诱导的幼鼠炎症性肠病

摘要

目的：
　　探讨JAK2抑制剂AG490对葡聚糖硫酸钠诱导的炎症性肠病模型幼鼠的影响及其可能机制。
　　方法：
　　将4周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只随机分为4组，正常组、模型组、DMSO干预组和AG490干预组。予模型组、DMSO干预组及AG490干预组幼鼠自由饮用3.5％葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)7天建立炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)模型，每日观察并记录幼鼠体重、大便性状、大便潜血/肉眼血便等一般状况，进行疾病活动指数(disease activity index，DAI)评分，造模7天后处死，取自肛门至盲肠处肠段并测量全结肠长度，对近端结肠及远端结肠组织进行苏木素&伊红(hematoxylin&eosin，H&E)染色观察肠道炎症改变并进行结肠组织损伤评分，流式细胞技术检测脾脏中调节性T(regulatory T，Treg)细胞和T辅助细胞17(T helper17，Th17)比例变化，酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中白介素-10(interleukin-10，IL-10)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-17A(interleukin-17A，IL-17A)水平的变化。
　　结果：
　　经过观察比较幼鼠的一般情况发现模型组及DMSO干预组自造模第6天起出现体重增长缓慢，并伴有稀便、大便潜血/肉眼血便，最终导致DAI较正常对照组急剧升高(p＜0.05)，AG490干预组的DAI较模型组及DMSO干预组明显降低(p＜0.05)，炎症性肠病幼鼠的一般情况明显改善。测量全结肠长度结果显示模型组及DMSO干预组全结肠长度明显小于正常对照组，AG490干预组全结肠长度较模型组及DMSO干预组明显增长(P＜0.05)。近端结肠组织切片H&E染色炎症改变不显著，各组间未见明显差异。模型组及DMSO干预组远端结肠组织切片H&E染色可见出现明显的隐窝及肠黏膜上皮损害、炎症细胞浸润、肠壁显著水肿，结肠组织损伤评分较正常对照组明显升高(P＜0.05)，而AG490干预后肠黏膜损害较前两组明显减轻，并伴随结肠组织损伤评分较模型组及DMSO干预组显著下降（P＜0.05）。流式细胞技术结果显示模型组及DMSO干预组幼鼠脾脏中CD25+Foxp3+ Treg细胞在CD4+T淋巴细胞中的比例明显低于正常对照组(P＜0.05)，而Th17细胞在淋巴细胞中的比例显著高于正常对照组(p＜0.05)，经过AG490治疗可使Treg细胞比例较模型组及DMSO干预组显著升高，Th17细胞比例较模型组及DMSO干预组降低，差异均有统计学意义(p＜0.05); ELISA检测结果显示模型组和DMSO干预组血清中IL-6及IL-17A水平较正常对照组明显升高(p＜0.05)，而IL-10较正常对照组明显降低(p＜0.05)，给予AG490干预后IL-6及IL-17A水平较模型组及DMSO干预组显著降低(P＜0.05)，IL-10水平较模型组及DMSO干预组明显升高(P＜0.05)。
　　结论：
　　JAK2抑制剂AG490通过调节Th17/Treg细胞平衡紊乱及相关细胞因子分泌异常降低疾病活动指数和减轻结肠组织损伤，从而缓解DSS诱导的IBD疾病病程。AG490的药用开发可能为有效治疗IBD提供新的途径。

目录

声明

摘要

英文缩略

前言

材料与方法

一、动物及分组

二、药品和主要试剂

三、动物模型建立

四、实验方法

五、统计学分析

实验结果

一、AG490缓解DSS诱导的大鼠幼鼠IBD临床表现

二、AG490降低远端结肠组织损伤评分

三、AG490对DSS诱导的IBD中Treg细胞和Th17细胞平衡紊乱的影响

四、AG490对DSS诱导的IBD幼鼠血清中炎性细胞因子的影响

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 Th17／Treg平衡在炎症性肠病中的意义

致谢

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