蕨高效愈伤组织无性系的建立与环境因子对愈伤组织分化的影响

摘要

本文研究了蕨[Pteridiumaquilinum(L.)Kuhn.]不同的外植体，在含有不同激素的培养基上诱导、分化及生根情况，并建立起蕨的高效再生体系。诱导愈伤组织的最适培养基为1/2MS+BA0.2mg/L+IBA0.4mg/L+NH4H2PO4200mg/L，诱导愈伤组织芽分化的最适培养基为1/2MS，芽的分化率为100％，不定苗在1/2MS+IAA0.2mg/L培养基上生根率为100％。同时可以形成健壮的根茎；具有根茎的试管苗移栽成活率为94％。以蕨愈伤组织为试验材料，以1/2MS，1/2MS+0.2mg/LIAA为培养基，在不同光照条件下诱导愈伤组织生长分化，直射光照条件下1/2MS+0.2mg/LIAA培养基上愈伤组织生长分化效果最佳；以1/2MS+0.2mg/LIAA为基本培养基，不同蔗糖浓度、不同光照条件下，直射光照，蔗糖浓度5g/L愈伤组织分化率最高。以诱导出的蕨愈伤组织为材料，以1/2MS为基本培养基，附加不同种类、不同浓度的激素，诱导愈伤组织并进行继代培养和分化；研究不同浓度的La(NO3)3对蕨愈伤组织生长分化的影响。结果表明：1.2mg/LLa(NO3)3对愈伤组织生长有显著的促进作用；1.2mg/LLa(NO3)3培养基诱导的愈伤组织比在不含La(NO3)3的分化培养基上分化效果要好，由此得出结论，微量的镧系元素有利于蕨愈伤组织的分化。用γ射线对具有100％分化率的蕨愈伤组织进行辐射处理，将未致死的愈伤组织于1～2℃无光条件下处理20d，再把未冻死的愈伤组织所分化的试管苗进行1～2℃低温处理。以低温处理后的试管苗叶片和叶柄为外植体，诱导形成的愈伤组织和分化的试管苗再进行低温选择，获得了耐寒蕨试管苗。由这种试管苗所形成的孢子苗仍然具有耐寒性证明：用剂量为5.16×10-1C.kg-1的γ射线对蕨的愈伤组织进行辐射处理并结合低温筛选，可选育出耐寒型蕨。

目录

第一章蕨类组织培养的研究

1外植体的建立

1.1以孢子为外植体

1.2以孢子体为外植体

2基本培养基的选择

3植物生长调节剂

4有机物的选用

5环境因子

5.1 pH值

5.2光

5.3温度

6消毒与灭菌

7糖源

8无机物

9培养方式

10研究进展

第二章蕨愈伤组织高效无性系的建立

1材料

1.1蕨植物的采集与处理

1.2主要试剂、培养基

2方法

2.1培养条件

2.2无菌外植体的制备

2.3愈伤组织的诱导

2.4愈伤组织的分化

2.5生根和移栽

3结果

3.1愈伤组织的诱导

3.2愈伤组织分化

3.3生根与移栽

4讨论

第三章不同环境因子对蕨愈伤组织生长分化的影响

1材料

1.1蕨愈伤组织的获得

1.2主要试剂、培养基

2方法

2.1培养条件

2.2愈伤组织生长分化

2.3光照对愈伤组织生长分化的影响

3结果

3.1不同光照条件对愈伤组织生长分化的影响

3.2不同蔗糖浓度对愈伤组织生长分化的影响

4讨论

第四章硝酸镧对蕨愈伤组织生长分化影响的研究

1材料

1.1蕨愈伤组织的获得

1.2主要试剂、培养基

2方法

2.1培养条件

2.2不同浓度硝酸镧对愈伤组织生长的影响

2.3愈伤组织的分化培养

2.4生根与移栽

3结果

3.1不同浓度硝酸镧对愈伤组织生长的影响

3.2愈伤组织的分化

3.3生根与移栽

4讨论

第五章辐射诱变愈伤组织选育耐寒性蕨

1材料

1.1蕨愈伤组织形成的试管苗

1.2主要试剂、培养基

2方法

2.1培养条件

2.2不同辐射剂量对愈伤组织的影响

2.3不同辐射剂量对愈伤组织分化率和变异率的影响

2.4低温处理对愈伤组织和试管苗的影响

3结果

3.1不同辐射剂量对愈伤组织的效应

3.2不同辐射剂量对愈伤组织分化率和变异率的影响

3.3低温处理对愈伤组织和试管苗的影响

4讨论

参考文献

在学期间发表论文情况

致谢

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