不同分散剂对海水青鳉早期发育的毒性影响的比较研究

摘要

为减小溢油造成的危害，管理者常使用化学分散剂分散表面水层的油污，以避免油污进入地下水层对海岸线和野生动物造成危害。然而，据调查化学分散剂的使用可显著增强原油的急性毒性，而针对生物分散剂的影响目前尚未见报道。在2010年大连“7.16”溢油事故中，为有效清除海面浮油，有关部门使用了大量化学分散剂和生物分散剂，二者添加后如何影响原油毒性及其潜在的长期环境效应均值得关注与评估。鉴于此，本研究将以海水模式鱼种海水青鳉的早期发育阶段为受试生物，以大连“7.16”溢油的原油及所使用的化学分散剂和生物分散剂为研究对象，比较两种分散剂与原油对鱼类早期发育毒性的影响。研究结果可为今后溢油的生物毒性评价及制定分散剂合理使用的管理策略提供一定的理论参考。
　　1.无论加入化学分散剂还是生物分散剂均可提高海水青鳉胚胎的畸形，BSD指数，死亡率，推迟孵化时间，降低孵化率。
　　2.原油分散液(WAF)、加入化学消油剂的分散液(CE-WAF)和加入生物消油剂的分散液(BE-WAF)对青鳉胚胎体内的CYP1A的诱导效应具有显著性差异。11d的CE-WAF和BE-WAF均出现随着浓度的增加先增加后降低的趋势。
　　3.WAF、CE-WAF、BE-WAF对青鳉初孵仔鱼的DNA损伤情况明显不同。WAF、CE-WAF、BE-WAF均可以引起DNA的损伤，但是根据严重的等级来看损伤的大小顺序为:CE-WAF＞WAF＞BE-WAF。
　　4.总石油烃含量(THC)的测定结果显示THC含量的大小顺序为:BE-WAF＞CE-WAF＞WAF。对三者17种PAH含量进行检测，发现三者含量较高的多环芳烃(PAH)依次为萘(Nap)、菲(Phe)、芘(Pyr)、芴(Fl)、苊(Acp)、二氢苊(Ace)。
　　5.加入分散剂后，对青鳉胚胎的毒性有显著的增加。根据现有的数据可推断毒性大小顺序为CE-WAF＞BE-WAF＞WAF。

目录

声明

摘要

1 绪论

1．1 海洋溢油污染

1．1．1 国内外海洋溢油污染

1．1．2 海洋中溢油的环境行为

1．1．3 海洋溢油污染危害及对生态系统的影响

1．1．4 消油剂及其影响

1．2 海洋溢油污染对鱼类早期发育的影响

1．2．1 溢油对鱼类早期发育影响的研究进展

1．2．2 鱼类早期发育毒性机制

1．3 大连溢油背景介绍

1．4 研究目的与意义

1．5 研究内容

1．6 技术路线

2 材料和方法

2．1 材料

2．1．1 试剂与仪器

2．1．2 受试生物

2．2 原油分散液和添加分散剂的原油分散液的制备方法

2．3 总石油烃(THC)含量和PAHs测定方法

2．4 毒性实验设计

2．5 发育畸形评价方法

2．5．1 畸形率

2．5．2 孵化时间和孵化率

2．5．3 死亡率

2．5．4 心率

2．6 BSD打分方法

2．7 体内EROD活性分析

2．8 DNA损伤分析方法

2．8．1 单细胞悬液的制备

2．8．2．凝胶的制备

2．8．3 细胞裂解

2．8．4 DNA解旋和电泳

2．8．5 中和与染色

2．8．6 图像分析与数据统计

2．9 生物体中PAHs含量分析

2．10 数据处理方法

3 结果

3．1 WAF、CE-WAF和BE-WAF中THC和PAHs含量

3．2 WAF、CE-WAF和BE-WAF对心率的影响

3．3 WAF、CE-WAF和BE-WAF对孵化率和孵化时间的影响

3．4 WAF、CE-WAF和BE-WAF对海水青鳝胚胎发育畸形的影响

3．6 WAF、CE-WAF和BE-WAF对死亡率的影响

3．7 WAF、CE-WAF和BE-WAF对CYP1A活性影响

3．8 WAF、CE-WAF和BE-WAF对DNA损伤的影响

3．9 生物体内PAHs含量

4 讨论

4．1 WAF、CE-WAF和BE-WAF中THC和PAHs浓度变化的比较研究

4．2 WAF、CE-WAF和BE-WAF对海水青鳉胚胎发育毒性的比较研究

4．3 作用机制探讨

结论

参考文献

攻读硕士期间发表学术论文情况

致谢