基于酵母聚糖A诱导的小鼠腹膜炎模型筛选具有抗炎活性的寡糖模拟肽

摘要

某些与特定寡糖空间构象类似的肽称为寡糖膜拟肽.利用寡糖的单克隆抗体,从随机的肽文库中筛选出与之结合力较强的肽序列作为该寡糖的模拟肽.寡糖与其模拟肽两者在空间构象上的相似性决定了两者在功能上存在着相似性,即寡糖模拟肽应能与寡糖的受体结合,阻碍寡糖与受体的相互作用.据此,在炎症过程中,若使用寡糖模拟肽作为抑制剂,可以阻断白细胞与内皮细胞的粘附及迁移,起到抑制炎症的作用.该文目的是在由酵母聚糖A(Zymosan A)诱导小鼠产生的急性腹膜炎模型中筛选具有抗炎活性的寡糖模拟肽.炎症模型的建立是利用酵母聚糖A(Zymosan A)能够诱导产生炎症的作用,以一定浓度的Zymosan A溶液注射到小鼠腹腔,引起小鼠的急性腹膜炎.然后使用该模型筛选6种表达寡糖LewisA和LewisX模拟肽的噬菌体,结果表明6种表达模拟肽的噬菌体对小鼠腹腔中性粒细胞渗出有不同程度的抑制,实验组与对照组中性粒细胞计数的比较及中性细胞内酶标记物髓过氧化物酶(MPO)活性的测定都证实了该结果.其中4<'＃>(表达的肽结构为IELLQAR)和G19噬菌体的抗炎活性较强.为进一步下实模拟肽的抗炎作用,再应用这2种模拟肽的化学合成的肽,观察其对小鼠急性腹膜炎的抑制情况.上述结果表明,Zymosan A作为化学刺激因子,诱导小鼠产生急性腹膜炎症,大量中性粒细胞渗出到腹腔.寡糖LewisA或LewisX的模拟肽,能在一定程度上抑制中性粒细胞的渗出,减轻炎症反应.这提示Zymosan A诱导血管内皮细胞表达E-选择素而引起中性粒细胞的渗出,而所筛选的寡糖LewisA或LewisX的模拟肽能够作为竞争性抑制剂与E-选择素结合,并阻断E-选择素与sLeX的作用,阻碍中性粒细胞与内皮细胞的粘附及渗出,减轻炎症反应引起的损伤,这为进一步研制和开发抗炎试剂提供了实验依据.

目录

摘要

Abstract

前言

酵母聚糖A诱导小鼠腹膜炎模型的制作

材料和方法

实验结果

由酵母聚糖A诱导的小鼠急性腹膜炎模型筛选具抗炎活性的寡糖模拟肽

材料和方法

实验结果

讨论

结论

展望

参考文献

综述选择素及其配体在抗粘附研究中的作用

参考文献

致谢