重组多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ（Myosin Ⅱ）的表达及其酶活性的测定

摘要

为了进一步研究重组多头绒泡菌myosinⅡ的特性以及LMM对Ca2+的敏感性和酶活性的影响，本实验在sf-9细胞中表达重组多头绒泡菌myosinⅡ，并对其Mg2+-ATPase活性做了初步研究，主要结果如下：重组多头绒泡菌肌球蛋白Ⅱ(RecombinantMyosinⅡofPhysarumpolycephalum，RMPP)的成功表达携带有重组多头绒泡菌重链(heavychain，HC)，磷酸化轻链(phosphorylatedlightchain，PLC)，钙结合轻链(Ca2+-bindinglightchain,CaLC)的重组杆状病毒载体共同转染sf-9细胞，并在其中共表达。培养3天后，提取，纯化，得到重组的多头绒泡菌MyosinⅡ。RMPPMg2十-ATPase活性的特征。　　CaLC变异的RMPPMg2+-ATPase活性被Ca2+轻微抑制，即myosinⅡ对Ca2+敏感性降低。说明Ca2+可能通过和myosinⅡ的CaLC结合来调节酶活性。本研究初步证实RMPP有良好的活性，其Mg2+-ATPase活性的特征与天然多头绒泡菌myosinⅡ的相似，说明重组myosinⅡ的构建和表达都是成功的。这为进一步研究RMPP亚单位的结构和功能奠定了基础。

目录

前言

实验材料、仪器设备和方法

结果

讨论

结论

参考文献

文献综述 多头绒泡菌（Physarum polycephalum）肌球蛋白钙依赖性调节机制

参考文献

致谢

论文说明：英文缩略语表