乳酸杆菌发酵滤液对人宫颈癌细胞株Hela细胞的抑制作用及机制研究

摘要

目的：宫颈癌发病率居妇科恶性肿瘤首位，近年来发病率有明显上升趋势。本文通过观察乳酸杆菌DM9811发酵滤液对宫颈癌细胞株Hela细胞的体外增殖、细胞周期、凋亡的影响，证实乳酸杆菌发酵滤液对宫颈癌细胞的抑制作用。并初步探讨可能的机制，为进一步确定乳酸杆菌DM9811发酵滤液中抑制宫颈癌的有效成份，从而开发出安全、有效、低成本的预防和治疗宫颈癌的药物打下基础，并为开发乳杆菌制剂的新用途打开思路。 方法：1.用MTT法研究不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液在不同时间对Hela细胞的抑制作用，在此基础上研究脂肪酸、菌体核酸在不同时间对Hela细胞的抑制作用。2.用光镜、电镜和流式细胞仪分析不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞凋亡的诱导。3.用流式细胞仪分析不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液对Hela细胞细胞周期的影响。 结果：1.不同浓度乳酸杆菌DM9811发酵滤液及相关物质在不同时间对Hela细胞的抑制作用显示：(1)乳酸杆菌DM9811发酵滤液各浓度组对Hela细胞的生长均有抑制作用，且这种抑制作用呈剂量-时间依赖方式。24h、48h、72h达到半数抑制率的发酵滤液浓度分别为8.9﹪、5.3﹪、3.8﹪。当发酵滤液浓度达10﹪，作用时间为24、48、72小时时抑制率分别为55.1﹪、63.8﹪、71.2﹪，阳性对照顺铂的抑制率为52.6﹪、62.9﹪、72.0﹪，其抑制作用与化疗药物顺铂的抑制作用无统计学差异。(2)乳酸杆菌DM9811发酵滤液脂肪酸对Hela细胞的生长有一定抑制作用，抑制率在7.0-34.0﹪之间。(3)乳酸杆菌DM9811菌体核酸对Hela细胞的生长有抑制作用，抑制率为9.7-53.4﹪，呈剂量-时间依赖方式。72h达到半数抑制率核酸的浓度为5.5μg/ml。 2.乳酸杆菌DM9811发酵滤液可诱导宫颈癌Hela细胞凋亡。形态学观察Hela细胞，可见细胞变形，细胞皱缩，体积变小，细胞间隙增大，细胞核固缩。流式细胞仪分析，1﹪、2﹪的乳酸杆菌DM9811发酵滤液在48h、72h可诱导Hela细胞凋亡；5﹪的乳酸杆菌发酵滤液在24h、48h、72h均可诱导Hela细胞凋亡。 3.乳酸杆菌DM9811发酵滤液阻滞宫颈癌Hela细胞于S期，不同浓度的乳酸杆菌发酵滤液作用24h、48h、72h均可使S期细胞比阴性对照组增多。

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致谢

参考文献

附图

综述 乳酸菌的抗肿瘤作用