拜阿司匹灵、西比灵联合预处理对高血糖SD大鼠局部脑缺血再灌注损伤的保护作用

摘要

本文采用正常血糖条件下和高血糖条件下SD大鼠局部脑缺血再灌注损伤模型，通过观察神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑组织病理形态及内皮细胞间黏附因子1(ICAM-1)、内皮素1(ET-1)和抑凋亡基因bcl-2的含量变化，来探讨(1)高血糖是否加重SD大鼠局部脑缺血再灌注后的损伤及其可能的机制；(2)拜阿司匹灵联合西比灵预处理对正常血糖条件下、高血糖条件下SD大鼠局部脑缺血再灌注损伤是否有保护作用及其可能的机制；(3)在不同血糖条件下，联合用药保护效果是否一致。 方法：72只雄性健康SD大鼠(体重200±20g)，随机分成4组：正常血糖组(对照组1，n=18)、高血糖组(对照组2，n=18)、正常血糖+拜阿司匹灵+西比灵组(治疗组1，n=18)、高血糖+拜阿司匹灵+西比灵组(治疗组2，n=18)。各组按缺血90分钟后再灌注3h(n=6)、6h(n=6)、24h(n=6)分为3个亚组。治疗组1及治疗组2于手术前三天开始每天一次分别给予拜阿司匹灵(6mg/kg体重)及西比灵(10mg/kg体重)行灌胃治疗。对照组1和治疗组1，术前30分钟腹腔注射生理盐水3g/kg体重，栓线前测血糖值小于11.1mmol/l，表示建模成功，为正常血糖组。对照组2和治疗组2术前30分钟腹腔注射50﹪葡萄糖3g/kg体重，建立高血糖模型，栓线前测血糖值达11.1mmol/l表示建模成功。 利用改良Longa-Zea氏线栓法制备SD大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型，于插线90分钟后拔出拴线，实行再灌注。参考Zea-Longa的5分制评分标准进行神经功能缺陷评分。各组断头取脑后以2﹪氯化三苯四唑啉(2，3，5-Triphenyltetrazaliumchloride，TTC)染色，判断缺血部位、用图像分析系统测量梗死体积，行苏木精-伊红(Hematoxylineosin，HE)染色观察脑组织病理形态，免疫组织化学方法观察ICAM-1、ET-1、bcl-2的表达。 分别比较：(1)对照组1与对照组2在相同再灌注各时间点神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑组织病理形态及ICAM-1、ET-1、bcl-2的表达；(2)治疗组1与对照组1在相同再灌注各时间点神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑组织病理形态及ICAM-1、ET-1、bcl-2的表达；(3)治疗组2与对照组2在相同再灌注各时间点神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑组织病理形态及ICAM-1、ET-1、bcl-2的表达；(4)不同血糖条件对预防性联合用药对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的影响。 结果：1、相同再灌注各时间点正常血糖组神经功能缺损评分好于高血糖组，且有显著性差异(p＜0.05)。高血糖条件下，于缺血再灌注后3小时即出现梗死灶，再灌注24小时内梗死体积逐渐增大，再灌注6小时与3小时、24小时与6小时比较，均有显著性差异(p＜0.05)；正常血糖组亦于缺血再灌注后3小时出现梗死灶，24小时内脑梗死体积逐渐增大，相同再灌注各时间点与高血糖组相比，脑梗死体积明显缩小，且有显著性差异(p＜0.05)。在高血糖条件下，脑缺血区神经元数目减少，神经细胞皱缩，变性，且与周围分界清楚，胞核固缩，组织间水肿明显，可见空泡化改变，随着再灌注时间延长，缺血神经元损害加重，呈不可逆性神经细胞损伤性改变，绝大多数神经细胞坏死；在相同再灌注各时间点正常血糖条件下脑缺血区随着再灌注时间的延长，脑组织受损程度也逐渐加重，但与高血糖组相同再灌注各时间点比较变性、坏死的神经元减少，空泡化改变减轻，组织间水肿减轻。高血糖条件下3小时可见ICAM-1阳性表达，24小时内逐渐增高。再灌注3小时可见ET-1阳性表达，24小时内缓慢增加。bcl-2于再灌注3小时开始明显增多，再灌注6小时达高峰，至24小时逐渐下降。正常血糖组与高血糖组相同再灌注各时间点比较：缺血区ICAM-1、ET-1表达减少，bcl-2表达增加，且均有显著性差异(p＜0.05)。 2、预防性应用拜阿斯匹灵及西比灵能减轻正常血糖条件下的局灶性脑缺血再灌注损伤。正常血糖条件下联合用药预处理组相同再灌注各时间点神经功能缺损评分好于正常血糖组(p＜0.05)；脑梗死体积明显小于正常血糖组(p＜0.05)；与正常血糖组相比变性、坏死的神经元减少，空泡化改变减轻，组织间水肿减轻ICAM-1、ET-1表达明显低于正常血糖组(p＜0.05)，而bcl-2表达则明显高于正常血糖组(p＜0.05)。 3、预防性应用拜阿斯匹灵及西比灵能减轻高血糖条件下的局灶性脑缺血再灌注损伤。高血糖条件下联合用药预处理组相同再灌注各时间点神经功能缺损评分好于高血糖组(p＜0.05)；脑梗死体积明显小于高血糖组(p＜0.05)；与高血糖组相比变性、坏死的神经元减少，空泡化改变减轻，组织间水肿减轻；ICAM-1、ET-1表达明显低于高血糖组(p＜0.05)，而bcl-2表达则明显高于高血糖组(p＜0.05)。 4、预防性应用拜阿斯匹灵及西比灵在正常血糖条件下与在高血糖条件下对局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用不同，高血糖与拜阿斯匹灵及西比灵联合预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤之间起负交互作用(拮抗作用)。 结论：(1)高血糖能加重SD大鼠局灶性缺血再灌注后脑组织损害。(2)拜阿司匹灵和西比灵联合预处理对正常血糖条件下及高血糖条件下SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤均有保护作用。(3)联合用药对正常血糖条件下脑缺血再灌注损伤及高血糖条件下SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用不同，高血糖能够抑制或减弱联合用药对脑缺血再灌注损伤的保护作用。

目录

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摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述 高血糖与脑缺血及脑缺血再灌注损伤

致谢