IL-1、β1，4-GalTⅠ在胚胎着床中的作用及对其它着床相关因子表达的影响

摘要

目的：哺乳动物的胚胎着床是一个极其复杂的过程。胚泡的成功植入依赖于胚胎与子宫之间恰当的相互作用。胚胎的发育起始于受精卵，它是一个单个的全能细胞，经过有丝分裂形成多细胞结构，即胚泡。同时，卵巢类固醇激素的增加启动信号级联放大过程，促进子宫内膜基质细胞蜕膜化，使子宫准备接受胚胎。各种着床相关因子的表达随着床进程发生变化，促进胚胎与子宫内膜的相互识别、黏附。 白细胞介素-1（Interleukin-1，IL-1）由巨噬细胞、间质细胞和滋养层细胞产生，是介导胚泡着床最主要的细胞因子之一。IL-1家族包括IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗剂（IL-1ra），研究表明：IL-1α和IL-1β在子宫内膜上皮细胞、间质细胞和内皮细胞中广泛存在；受精卵的成功植入与胚胎环境中高浓度的IL-1α和IL-1β相关；IL-1Ⅰ型受体（IL-1RⅠ）基因敲除的小鼠生育能力受到损伤。 β1，4-半乳糖基转移酶Ⅰ（β1，4-galactosyltransferaseⅠ，β1，4-GalTⅠ）是糖基转移酶中最早被纯化的，也是研究最深入的成员之一，主要定位于大多数真核细胞的高尔基体，参与糖蛋白和糖脂中寡糖链的延伸。β1，4-GaITⅠ还被发现存在于细胞表面，是细胞外糖苷底物的受体。细胞表面的β1，4-GalTⅠ作为一种黏附分子，参与细胞黏附、铺展、精卵识别、神经轴突生长、组织形成和肿瘤转移，而胚胎着床与肿瘤转移、侵袭过程非常相似。 本文主要以IL-1和β1，4-半乳糖基转移酶Ⅰ作为研究对象，观察它们在胚胎着床中的作用，及对子宫内膜其它着床相关因子表达的影响，进而探讨胚胎着床的调控机理。 方法：将已构建好的β1，4-GalTⅠ基因干扰质粒、过表达质粒、干扰对照质粒和空载体质粒分别转染RL95-2细胞（模拟着床期子宫内膜细胞）后，采用免疫印迹（Dot-blot）、RT-PCR等技术分析各组转染细胞中β1，4-GalTⅠ对IL-1β和MMP-9表达的影响；将着床相关因子IL-1β及其受体拮抗剂IL-1ra分别与RL95-2细胞共培养，检测11-1β对β1，4-GalTⅠ、MMP-9和COX-2表达的调控；通过由RL95-2细胞（模拟着床期子宫内膜）和JAR细胞（模拟着床期胚胎）组成的体外着床模型，观察β1，4-GalTⅠ对胚胎黏附率的影响。 结果：质粒转入RL95-2细胞60h后，细胞内有明显的绿色荧光蛋白表达；RT-PCR结果显示：与正常培养组、空载体组和干扰对照组相比，β1，4-GalTⅠ的基因表达明显降低；过表达组βl，4-GalTⅠ基因表增高，说明质粒转染效果良好。同时观察到，抑制βl，4-GalTⅠ的基因表达，MMP-9基因表达和蛋白合成降低，JAR细胞的黏附率（36．2%）低于正常培养组（72．1%）、空载体组（70．6%）和干扰对照组（68．7%）；过表达βl，4-GalTⅠ，MMP-9基因表达和蛋白合成增高，JAR细胞的黏附率（83．9%）也明显增高。但是调控，βl，4-GalTⅠ基因的表达，对IL-1β的表达无明显影响。 RL95-2细胞经与IL-1β共培养24h后，与正常培养组相比βl，4-GalTⅠ、MMP-9和COX-2基因的表达增高，而RL95-2细胞与IL-1ra共孵育24h后，βl，4-GalTⅠ、MMP-9和COX-2基因的表达降低。 结论：βl，4-GalT参与胚胎着床，并可能通过影响子宫内膜细胞MMP-9的表达来调节母-胎之间的识别和黏附。 IL-1β可以通过上调子宫内膜βl，4-GalTⅠ、MMP-9和COX-2的表达，进而参与胚胎着床。

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综述 基质金属蛋白酶(MMPs)在胚胎侵入中的作用

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