大承气汤修复多器官功能障碍综合症肠神经-CAJAL间质细胞-平滑肌细胞网络损伤实验研究

摘要

多器官功能障碍综合症（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）是一种在严重感染、创伤、休克及大手术等原发病发生后，机体同时或序贯发生两个或两个以上器官或系统功能障碍的临床综合征，以高代谢、高动力循环状态、过度失控的炎症反应和器官功能障碍为特征的临床综合征，是腹部外科患者死亡的重要原因。现在观点认为，MODS一般由全身炎症反应综合征（systemic inflammation response syndrome，SIRS）和代偿性抗炎性反应综合征（Compensatroy anti-inflammatory response syndrome，CARS）发展而来。胃肠道被认为是促发SIRS和MODS的始动器官与靶部位。胃肠功能状态被认为是判断危重病人预后的一项重要指标。胃肠运动功能的恢复有助于有效地阻断MODS的进一步发展。胃肠道Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICC）相互间形成网络状结构广泛分布于胃肠道各节段和各肌层。目前认为ICC有三个主要功能：①是胃肠肌肉的起搏细胞，能产生和传导生理性慢波，控制胃肠道平滑肌的收缩和蠕动。肌间ICC（ICC-MY）具有基本节律起搏和传播功能，能够产生慢波；②是胃肠道肠神经系统（enteric nerve system，ENS）信号向平滑肌细胞（smooth muscle cells，SMC）的传送的信息整合中转站。深部肌间神经丛ICC（ICC-DMP）是肠神经作用的首要靶细胞，肠神经释放的递质主要是通过ICC-DMP来调节；从而在调控胃肠动力的发生与变化。另外ENS运动末梢、肌间ICC、SMC相互联系形成网络，构成胃肠动力基本功能单位（basic functional unit of gastrointestinal motility，BFUGM），肠神经-ICC-平滑肌网络与胃肠运动功能障碍密切相关；③促进电活动扩布。 目的：以细菌性腹膜炎致MODS大鼠模型为研究对象，观察MODS大鼠模型小肠神经-ICC-平滑肌网络的形态学变化以及大承气汤（Da-Cheng-Qi-Tang，DCQT）治疗的影响，探讨MODS致胃肠运动障碍的产生机制和大承气汤治疗MODS机理。 方法：健康成年Wistar大鼠100只，雌雄各半，体重200g-250g，随机分组如下：对照组（20只）、MODS模型组（40只）和DCQT治疗2组（40只）。对照组每只大鼠予腹腔注射1ml生理盐水。MODS模型组和DCQT治疗组每只大鼠予腹腔注射1mlE．coloi．混悬液，建立细菌性腹膜炎致MODS模型。DCQT治疗组于造模前2日给予DCQT灌胃，2次/日，每次1ml/100g。造模24小时后取存活大鼠上段小肠组织制作肠肌层全厚组织标本，进行c-Kit抗体和囊泡装乙酰胆碱转运体（VAChT）抗体，血管活性肠肽（VIP）抗体，P物质（SP）抗体以及神经型一氧化氮合酶（nNOS）抗体免疫荧光双标记染色后用于激光扫描共聚焦显微镜检测、分析。 结果： 1．大体标本较之对照组，MODS组大鼠胃肠极度扩张，胃肠梗阻征象明显；DCQT治疗组胃肠扩张、梗阻较MODS组明显减轻。 2．免疫荧光共聚焦显微镜检测①ICC-DMP网络：与对照组相比，MODS组大鼠ICC-DMP数量明显减少（p<0．01），ICC突触的数量减少，相互间的连接不连续，细胞荧光IOD值减弱（p<0．01），完整的网络样结构消失；DCQT治疗组大鼠ICC-DMP数量比MODS组明显增多（p<0．01），ICC-DMP突触明显增多，细胞的荧光IOD值比MODS组明显增加（p<0．01），基本保持网络状结构；②肠神经：与对照组相比，MODS组大鼠小肠乙酰胆碱（Ach）／P物质／（SP）／血管活性肠肽（VIP）／氮能（NO）神经纤维数量明显减少（p<0．01），荧光IOD值明显减弱（p<0．01），神经网结构紊乱，彼此间的连接减少，完整的神经网络样结构消失。DCQT治疗组大鼠小肠乙酰胆碱（Ach）／P物质／（SP）／血管活性肠肽（VIP）／氮能（NO）神经纤维数量比MODS组明显增多（p<0．01）基本维持神经网络状结构，细胞的荧光IOD值比MODS组明显增加（p<0．01），基本维持神经网络状结构；③肠神经-ICC-平滑肌网络：与对照组相比，MODS组大鼠肠神经与ICC数量明显减少，相互间连接疏松，肠神经-ICC-平滑肌网络明显受损。DCQT治疗组大鼠肠神经与ICC数量较MODS组明显增加，肠神经-ICC-平滑肌网络基本保持完整。 结论：①细菌性腹膜炎致MODS组大鼠胃肠极度扩张，胃肠梗阻征象明显；DCQT治疗能够显著改善胃肠麻痹梗阻征；②MODS状态下，ICC-DMP数量减少，网络受到破坏；DCQT的防治可以减轻ICC-DMP的损伤，基本维持ICC-DMP网络结构的完整；⑨MODS状态下，小肠Ach/SP/VIP/氮能神经和ICC-DMP数量减少，肠神经网络样结构受到破坏；DCQT的防治能够减轻小肠神经的损伤，维持肠神经网络样结构的完整；④MODS状态下，ICC-DMP和小肠神经纤维数量明显减少，相互间联系中断紊乱，肠神经-ICC-平滑肌网络受到明显损伤。DCQT的防治够明显减轻ICC-DMP和小肠神经纤维数量的减少，肠神经-ICC-平滑肌网络结构基本保持完整。

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声明

综述：肠神经-Cajal间质细胞-平滑肌网络研究进展与胃肠动力障碍性疾病研究进展

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材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

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