Wnt-1及βcatenin在大肠侧向发育型肿瘤组织中的表达及意义

摘要

目的：大肠侧向发育型肿瘤(laterally spreading tumors， LSTs)是起源于大肠粘膜的一类特殊类型的表浅型大肠肿瘤。其具有不同于大肠隆起性腺瘤型息肉(protruded-type colorectal adenomas， PAs)的特殊生物学特点，且具有更高的癌变潜质，已受到越来越多研究者的关注。然而，目前对LSTs的研究主要是在临床内镜的诊断及治疗等方面，关于其特殊生长方式及高恶变潜质的基础研究还十分缺乏。本研究旨在通过比较LSTs与PAs在患者年龄、性别、病变大小、病变位置、病理类型及是否伴有上皮内瘤变等方面的差异，了解LSTs所特有的临床及组织病理学特点；通过检测LSTs、PAs及正常粘膜组织中Wnt-1及β-catenin在蛋白质及mRNA水平的表达情况，探讨LSTs中是否存在Wnt/β-catenin信号通路的激活及可能的调节机制。
　　 方法：本实验分为LSTs组、PAs组及正常粘膜组，分别收入符合入组标准的病例23例、24例及5例，对前两组病例在患者年龄、性别、病变大小、病变位置、病理类型及是否伴有上皮内瘤变等临床及组织病理学方面进行了对比；采用免疫组织化学染色(immunohistochemstry， IHC)的方法，检测了Wnt-1及β-catenin在LSTs、PAs及正常粘膜组织中蛋白水平的表达情况，并对两者进行了相关性的分析；与蛋白质分析相平行，采用反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction， RT-PCR)的方法检测了Wnt-1及β-catenin在mRNA水平的表达情况。以上所有数据均应用SPSS11.5统计软件进行分析。
　　 结果：
　　 1、临床及组织病理学特点：LSTs与PAs相比，在患者年龄、性别、组织病理类型及是否伴有上皮内瘤变等方面的差异无统计学意义(P＞0.05)；在病变大小方面，LSTs组直径约为30.9±16.2mm，PAs组直径约为16.2±6.2mm，前者明显大于后者，差异有统计学意义(P＜0.001)；LSTs组多分布于直肠(47.8％)及右半结肠(43.5%)，而PAs组主要分布于左半结肠(62.5%)，其次为直肠(25%)，两者在病变位置方面的差异有统计学意义(P＜0.001)。
　　 2、免疫组化：在正常粘膜中β-catenin主要表达于细胞膜上，胞质中可见少量表达，而PAs组及LSTs组中均见β-catenin在胞质及胞核中的异位表达。以β-catenin在胞质中的异位表达为阳性表达，各组间比较差异有统计学意义(P=0.001)，LSTs组中β-catenin的阳性表达明显高于PAs组(P=0.006)，另外，LSTs组中有26.1%可见β-catenin在胞核的弱表达，而PAs组仅有4.2%，两者比较差异有统计学意义(P=0.035)；Wnt-1的阳性表达在细胞质，LSTs组及PAs组中均见其阳性表达，且前者明显高于后者，差异有统计学意义(P=0.006)，而正常粘膜中则表达缺如，或仅有少量表达；在LST组中Wnt-1的高表达与β-catenin异位表达之间存在明显正相关(rs=0.579，P＜0.01)。
　　 3、RT-PCR: LSTs组中β-catenin在mRNA水平的表达量（0.57±0.05）较PAs组（0.51±0.09）及正常粘膜组（0.49±0.04）高，但差异无统计学意义(P＞0.05); LSTs组中Wnt-1在mRNA水平的表达量（0.41±0.11）较PAs组（0.23±0.04）明显增高(P=0.017)，正常粘膜组仅见Wnt-1的微弱表达（0.05±0.02）。
　　 结论：
　　 1、LSTs与PAs相比，其病变直径更大，且好发于右半结肠及直肠。
　　 2、LSTs中存在Wnt-1在蛋白水平及mRNA水平的高表达以及β-catenin在蛋白水平异位表达的明显增加，而且两者之间存在明显的正相关，即Wnt-1的高表达可以导致β-catenin在胞质内的积聚，表明与PAs相比LSTs中存在更多的Wnt/β-catenin信号通路的激活，可能与其高恶变潜质有关，且Wnt-1可能为β-catenin蛋白异位表达的一个上游调控因子。
　　 3、β-catenin在蛋白水平及mRNA水平表达的不同，表明Wnt/β-catenin信号通路的激活可能不是β-catenin在转录水平的异常增加所致，而是由于β-catenin蛋白的异位表达所致。