三氧化二砷联合Hedgehog(Hh)信号通路拮抗剂Cyclopamine(环靶明)对非雄依赖前列腺癌移植瘤生长的影响

摘要

目的：研究三氧化二砷(As2O3)联合Hedgehog(Hh)信号通路拮抗剂(Cyclopamine(环靶明)对非雄依赖前列腺癌生长的影响。
　　 方法：首先应用四唑盐(MTT)比色实验检测三氧化二砷联合Hedgehog(Hh)信号通路拮抗剂（Cyclopamine（环靶明）对前列腺肿瘤细胞(PC-3)的增殖抑制情况。用流式细胞术检测给药后肿瘤细胞凋亡情况。并且通过构建体外肿瘤球模型观察给药后肿瘤的生长情况，模拟给药后药物在体内对肿瘤生长的抑制能力。其次，建立非雄激素依赖前列腺癌裸鼠移植瘤模型，随机分为阴性对照组（A组）、三氧化二砷(As2O3)剂组（B组）、Cyclopamine（环靶明）组（C组）、三氧化二砷(As2O3)剂+Cyclopamine（环靶明）组（D组）分别处理。每天分别用设定浓度的生理盐水、三氧化二砷(As2O3)、Cyclopamine（环靶明）、三氧化二砷(As2O3)+Cyclopamine（环靶明）对移植瘤裸鼠行腹腔内注射，观察裸鼠的生存情况，每三天测量一次肿瘤体积大小，待裸鼠死亡后取肿瘤组织、血液，做如下处理:1.血液谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(Cr)检验了解药物对肝肾功能影响;2.统计瘤体体积变化情况;3，统计各组荷瘤裸鼠给药后的中位生存期。
　　 结果：实验结果表明，三氧化二砷(As2O3)和Hedgehog(Hh)信号通路拮抗剂Cyclopamine（环靶明）联合应用能够很好的抑制肿瘤细胞的增殖。联合用药与单独用药相比能够显著的减少用药量。肿瘤球实验表明，联合用药对于肿瘤球的生长具有更好的抑制作用。荷瘤裸鼠给药后考察了肝肾指标，结果表明，含三氧化二砷剂的给药组对肝肾影响最大。不同给药组肿瘤的体积大小不同。联合用药能够更好的抑制肿瘤的生长。不同给药组的中位生存期分别为A组18天，B组25天，C组27天，D组38天。
　　 结论：三氧化二砷(As2O3)和Hedgehog(Hh)信号通路拮抗剂Cyclopamine（环靶明）均明显抑制非雄性激素依赖型前列腺癌移植瘤的生长。三氧化二砷对荷瘤小鼠有较大毒性作用。二者联合应用后，能够发挥协同作用，在较少剂量下达到更有效的抗肿瘤作用，达到减量增效的效果。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1．实验材料

1．1 主要试剂

1．2 主要仪器

2 实验方法

2．1 相关试剂配制

3、实验步骤

3．1 细胞培养

3．2 联合应用三氧化二砷(As2O3)和Hh信号通路拮抗剂Cyclopamine(环靶明)对肿瘤细胞增殖抑制实验

3．3 PC-3肿瘤细胞肿瘤球的构建以及联合应用三氧化二砷(As2O3)合Hedgehog(Hh)信号通路拮抗剂Cyclopamine(环靶明)对肿瘤球的抑制实验

3．4 流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况

3．5 非雄依赖前列腺癌裸鼠移植瘤模型的构建

3．6 联合用药对肿瘤生长的抑瘤率对比

3．7 荷瘤裸鼠的生存期统计

讨论

结论

参考文献

综述

致谢