粪肠球菌对大鼠实验性根尖周炎TLR2表达影响的研究

摘要

目的:研究粪肠球菌在大鼠根尖周炎过程中对Toll样受体2（TLR2）的表达影响。
　　 方法:成年雄性SD大鼠40只，右侧下颌第一磨牙开髓后，随机分为A、B两组，每组20只。A组髓腔内封入PBS缓冲液棉球，玻璃离子暂封;B组髓腔内封入粪肠球菌菌悬液棉球，玻璃离子暂封;对照组为健康的左侧下颌第一磨牙。A、B两组再分别以1周、2周、3周、4周4个时间点分为A1、A2、A3、A4、B1、B2、B3、B4共8个亚组，每组5只。在规定时间点用乙醚处死大鼠，分离下颌骨，挖匙刮取下颌第一磨牙根尖区牙周膜、牙槽骨区域，提取组织RNA，逆转录cDNA，采用Real-time PCR方法检测各组TLR2 mRNA在实验性鼠根尖周炎中的表达水平。实验结果采用SPSS16.0进行统计学分析。
　　 结果:
　　 1.对照组中有少量TLR2 mRNA表达，A组术后1周到2周TLR2 mRNA的表达水平逐渐增高，分别为对照组的1.71倍、2.49倍，差异具有统计学意义(P＜0.05)，3周达最高峰，为对照组的2.94倍，差异具有统计学意义(P＜0.05)，但4周开始下降，为对照组的1.79倍，差异具有统计学意义(P＜0.05)。4个实验组除1周、4周之间差异无统计学意义(P＞0.05)外，其余各组之间差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 2.B组术后1周到2周TLR2 mRNA的表达水平逐渐增高，分别为对照组的2.30倍、2.77倍，差异具有统计学意义(P＜0.05)，3周达最高峰，为对照组的3.31倍，差异具有统计学意义(P＜0.05)，但4周开始下降，为对照组的2.45倍，差异具有统计学意义(P＜0.05)。4个实验组除1周、4周之间差异无统计学意义(p＞0.05)外，其余各组之间差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 3.A、B两组术后1周、2周、3周、4周TLR2 mRNA的表达水平，B组均高于A组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 结论:
　　 1.Toll样受体2(TLR2)参与了根尖周炎的整个过程，Toll样受体2（TLR2）的表达水平与根尖周炎密切相关，并在其中发挥重要作用。
　　 2.Toll样受体2(TLR2)与粪肠球菌感染为主的根尖周炎密切相关，粪肠球菌能使Toll样受体2(TLR2)的表达水平增高。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1．实验材料

1．1 实验动物

1．2 试剂及材料

1．3 主要仪器设备

1．4 试剂的配置

2．实验方法

2．1 动物分组

2．2 建立两种实验性大鼠根尖周炎动物模型

3．Real-time PCR检测TLR2的表达

3．1 根尖组织取材

3．2 根尖周组织总RNA的提取

3．3 RNA的纯化

3．4 总RNA浓度的测定

3．5 逆转录反应

3．6 引物的设计与合成

3．7 实时荧光定量PCR

3．8 标准曲线和计算方法

3．9 数据的收集和统计学分析

结果

1．大鼠根尖周组织总RNA提取结果

2．内参基因及目的基因的标准曲线

3．内参基因及目的基因的扩增曲线

4．统计分析

讨论

结论

参考文献

综述

附录

英文缩表

致谢