乙酰化白藜芦醇对脂多糖引起的急性肺损伤作用的研究

摘要

研究背景:急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是一类由非心源性的各种肺内外致病因素导致的肺泡上皮和毛细血管内皮损伤，血管通透性增高的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭严重可引起死亡。乙酰化白藜芦醇(AcetylResveratrol，ARES)是白藜芦醇的前药，化学名称为3，4'，5-三乙酰氧基反式二苯乙烯，具有多种药理活性本实验选用ARES，观察脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)的程度，并探讨ARES对LPS致大鼠ALI的防治作用。
　　目的:1）利用LPS建立大鼠ALI的病理模型;
　　2)利用大鼠ALI模型，探讨ARES对ALI的防治作用;
　　3)初步探讨ARES对ALI的防治作用的作用机制。
　　以期通过上述实验观察LPS致大鼠急性肺损伤(ALI)的程度，并探讨ARES对LPS致大鼠ALI的防治作用。
　　方法:Wistar大鼠由大连医科大学实验动物中心提供，以准备LPS引起的大鼠ALI模型。本研究借助以上动物开展以下研究:
　　1)建立LPS致大鼠ALI为病理模型，观察肺形态和性状变化确认模型建立成功;
　　2)采用H&E染色(Hematoxylin and eosin，H&E)方法检测ARES处理前后肺组织常规病理检查;
　　3)检测ARES处理前后肺系数、肺泡灌洗液总蛋白含量和肺毛细血管通透性;
　　4)采用RT-PCR检测肺组织匀浆中炎症因子COX-2在RNA水平表达的变化;
　　5)实验数据采用SPSS11.5软件包应用t-test，One-Way ANOVA和MammWhitney等检验方法进行统计分析。
　　结果:1）成功利用LPS建立大鼠ALI的病理模型;
　　2) ALI模型组相比正常组肺部呈深红色，体积增大，表面光滑发亮，布满出血点，并伴有水肿液大量渗出现象;
　　3) H&E染色显示正常大鼠肺组织可见支气管和肺泡组织，肺泡大小基本相同，结构清晰完整，肺泡壁薄且腔内无充血和水肿;ALI模型组肺泡组织严重破坏，泡壁增厚，泡腔狭窄且布有红色染液，肺泡严重水肿，大量红细胞弥漫渗出，肺泡弥漫不张，肺泡表面大量聚集中性粒细胞和巨噬细胞;给药预防组及治疗组相比ALI模型组肺泡结构较为完整，泡壁增厚不显著，泡腔内少量水肿液，肺表面聚集的中性粒细胞和巨噬细胞较轻;
　　4) ALI模型组相比正常对照组肺湿干比有显著性差异(P＜0.05)，且BALF总蛋白含量与肺毛细血管通透性均有极显著性差异(P＜0.01);
　　5）给药预防组及治疗组相比ALI模型组肺湿干比有显著性差异(P＜0.05)，BALF总蛋白含量及肺毛细血管通透性均有极显著性差异(P＜0.01);
　　6）RT-PCR结果显示ALI模型组大鼠2h后肺组织COX-2的表达明显上升，至8h后COX-2的表达显著高于正常组;给药预防组2h后COX-2表达下调，8h后COX-2的表达接近于正常组;给药治疗组2h、8h后COX-2表达与LPS模型组比较有下调但仍明显高于正常组;
　　结论:预防及治疗给予ARES均能降低大鼠肺部蛋白漏出，改善气血屏障通透性，减轻肺部水肿程度，降低肺组织匀浆中的炎症因子COX-2，对大鼠LPS致ALI有一定的防治作用。