犬撞击性脊髓损伤急性期脊髓血流变化的初步研究

摘要

研究目的:急性脊髓损伤(Spinal Cord Injury，SCI)是急诊创伤常见的高致残疾病之一。目前脊髓损伤的急诊室处理集中关注在生命支持、脊柱的固定及防止二次损伤。但大量文献表明这些处理并不能降低SCI患者的致残率，并提出这与撞击性SCI脊髓的继发性损伤密切相关。SCI的继发性损伤是脊髓中央灰质出血、脊髓血流锐减及缺血再灌注损伤导致神经元细胞水肿、脂质过氧化、自由基的形成、细胞膜溶解和炎症等级联反应，最终细胞凋亡或坏死。脊髓血流(SpinalCord Blood Flow，SCBF)的变化是参与SCI继发性损伤的重要因素之一，所以研究脊髓血流变化是研究SCI的病理生理机制的重要部分。脊髓结构中央主要为神经元细胞构成的蝶形灰质区和四周被有髓纤维细胞构成的白质区。目前SCBF的监测方法常用监测探头位于脊髓表面，实时分区域的血流监测还没见报道，灰质与白质不同区域的血流在撞击性SCI后的变化规律还不十分清楚。因此本课题针对SCBF监测方法的不足，利用针刺式探头激光多普勒血流监测仪(Needle Probe-Laser Doppler Flowmetry，NP-LDF)监测犬撞击性SCI急性期脊髓不同区域的SCBF，初步观察其在SCI后的灰质与白质不同区域变化规律，为进一步了解其病理机制及临床救治提供初步理论依据。
　　研究方法:8只比格犬根据随机数字表法随机分为对照组2只，SCI组6只。对照组只去除犬胸12-胸13（T12-T13）节段脊髓后方结构暴露脊髓，不进行撞击损伤;SCI组去除犬T12-T13脊髓后方结构并利用数控电机撞击装置进行脊髓损伤造模。SCI组动物使用NP-LDF分别于脊髓暴露时，SCI后第5min，第60min，第7d，第3w，对照组动物与SCI组动物对应时间对脊髓损伤处中央灰质区、腹侧白质区及背侧白质区血流进行监测;两组动物术后第1d，第7d，第3w进行神经电生理检测:体感诱发电位(Somatosensory Evoked Potentials，SEP)和运动诱发电位(Motor Evoked Potentials，MEP)，并利用TSCIS法评估犬后肢行为学功能。SCI组动物分别于术后第7d、第3w随机选取3只处死，取标本进行组织病理学观察。
　　研究结果:1.SCI组所有动物造模成功并进入实验;2.SCBF值:两组动物在脊髓暴露时中央灰质基础值与腹侧白质基础值、背侧白质基础值差异均有统计学意义(P＜0.05);腹侧白质基础值与背侧白质基础值差异无统计学意义(P＞0.05); SCI组与对照组脊髓各区域SCBF值在术后各相应时间节点比较差异均有统计学意义(P＜0.05); SCI组中央灰质区、腹侧白质区及背侧白质区:SCI后第5min与SCI后第60 min、第7d、第3 w SCBF值比较及术后第60min与术后第7d、第3w SCBF值比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，SCI后第7d与第3w比较差异无统计学意义(P＞0.05);SCI后第5min、第60min、第7d、第3w与脊髓暴露时比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。3.TSCIS评分:对照组动物术后第1d、第7d、3w评分均为20分;SCI组中SCI后第1d均值为0分、第7d、第3 w TSCIS值均为0.33±0.52分，差异均无统计学意义(P＞0.05);与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);4.神经电生理监测:MEP及SEP在SCI各时间点均未发现任何波动记录，双后肢逐渐挛缩，仅靠前肢活动。5.组织学: SCI后第7d病理切片示:脊髓部分失去正常组织，中央灰质坏死，囊腔形成;SCI后第3 w病理切片示:脊髓完全失去正常组织，灰质与白质未见明显界限，多囊腔中出现胶质细胞。
　　研究结论:1.NP-LDF能够精确地测量脊髓中央灰质、腹侧白质、背侧白质的血流;2.脊髓中央灰质、腹侧白质、背侧白质的血流在撞击性SCI后短暂上升然后随着时间变化迅速下降，最后到达稳定。说明SCI继发性损伤在原发性损伤后随之而来;3.本实验中使用NP-LDF刺入脊髓对SCBF进行监测，虽然为有创监测手段，但在课题研究显示探头刺入脊髓对脊髓功能是没有影响的，且能更为准确地反映SCI后脊髓血供的变化。

目录

声明

摘要

(一)前言

(二)材料和方法

2．1 材料

2．1．1 实验动物及饲养

2．1．2 主要实验仪器和试剂

2．2 方法

2．2．1 实验分组

2．2．2 手术

2．2．3 术后管理

2．2．4 实验指标检测

2．3 统计学分析

(三)结果

3．1 动物模型情况

3．2 SCBF监测结果

3．3 神经电生理结果

3．4 TSCIS评分结果

3．5 组织学观察

(四)讨论

4．1 NP-LDP评估SCBF的方法研究

4．2 NP-LDF对撞击性SCI脊髓中央灰质、腹侧白质、背侧白质SCBF的监测研究

4．3 撞击性SCl的SCBF变化与脊髓功能、组织学的关系

4．4 撞击性SCI的SCBF变化对SCI急诊救治的临床意义

(五)结论

参考文献

文献综述：甲泼尼龙治疗急性脊髓损伤的进展

攻读学位期间发表论文情况

致谢