环氧化酶在炎症因子引起冠状动脉无复流现象中的作用机制研究

摘要

目的：
　　初步观察炎症因子（CRP、IL-6）与AMI急诊PCI前后冠脉血流的关系，通过建立CRP浓度刺激的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)模型，探讨环氧化酶(COX)1、2在炎症因子引起冠状动脉无复流现象中的作用及机制，寻找预测无复流的临床指标，从而为进一步提高PCI术后远期疗效提供可行的治疗方案和指导。
　　方法：
　　临床研究:入选2012年1月至2014年1月44例因急性心肌梗死入住本院的患者，其中男性35名，女性9名，年龄31～91岁，平均年龄60.93±14.46岁，梗死时间＜12小时。急性心肌梗死的诊断依据美国心脏病学会(ACC)和欧洲心脏病(ESC)学会标准。入选标准:(1)长时间的胸痛（时间＞30分钟）;
　　(2)标准心电图上在2个或2个以上相邻导联ST段抬高＞0.20 mV;(3)胸痛发作6小时内执行直接PCI或补救PCI。为避免其他变量影响C-反应蛋白的水平，术前排除PCI前2个月内有手术或外伤史者、肾功能不全（肌酐＞1.50 mg/ dl）、恶性肿瘤、发热性疾病，不明原因发热者（体温≥37.5℃），急性或慢性炎性疾病以及近期感染的患者。所有纳入研究的患者均符合完全或部分冠状动脉急性闭塞，参照GIBSON等冠状动脉血流分级方法，相关动脉PCI前TIMI心肌灌注分级(TMPG)为0-1级，术前静脉取血;术后根据患者冠状动脉血流情况分为两组，TMPG0-1级为无复流组(n=13); TMPG2-3级为复流组(n=31)。所有患者均自愿参加本研究，签署知情同意书。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。采用ELISA试剂盒测定急诊PCI术前血清炎症因子（CRP、IL-6）水平，观察其与术后无复流现象之间的关系。
　　基础实验:构建人冠状动脉内皮细胞(HCAEC) CRP刺激的模型:(1) CRP刺激试验:对照组、5分钟组、30分钟组和60分钟组，即在饥饿处理后的HCAEC培养皿中加入CRP，于5分钟、30分钟和60分钟分别终止CRP刺激，空白对照组加入等量溶剂;(2)细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated proteinkinases，ERK1/2)、c-jun氨基末端激酶(c-jun N terminal kinase，JNK1/2)抑制试验:对照组、ERK1/2抑制剂预处理组、JNK1/2抑制剂预处理组和同时加用pd98059和sp600125组(CRP+PD+SP组)。运用Real-Time PCR、Western Blot测定COX1，2基因转录、蛋白表达情况，探讨CRP在无复流发生发展中的作用机制。
　　统计分析:采用应用SPSS20.0版软件进行数据统计处理，计量资料采用x±s表示，成组设计资料的行t检验;计数资料以百分率表示，多组间的计量资料比较采用方差分析，在方差分析P＜0.05条件下，再行组间两两比较。P＜0.05为差异有统计学意义。图表资料采用GraphPad Prism5.0绘制。
　　结果：
　　无复流患者CRP、IL-6水平明显高于灌注良好者，差异具有统计学意义(P＜0.05);在CRP刺激HCAEC模型中，CRP刺激组COX1，2表达水平高于对照组，应用细胞外信号调节激酶(ERK1/2)和氨基末端激酶(JNK1/2)抑制剂后COX表达显著降低，差异均有显著统计学意义(P＜0.01)。
　　结论：
　　CRP可通过激活COX炎症通路，诱发AMI急诊PCI术后无复流现象的产生，可能成为急性心肌梗死患者急诊PCI术后发生无复流现象的重要预测因子。

目录

声明

摘要

(一)前言

第一部分 临床研究

(二)资料与方法

1．资料

2．方法

(三)结果

(四)讨论

(五)结论

参考文献

第二部分 基础研究

(二)材料和方法

1．细胞培养

2．主要实验方法

3．统计学处理

(三)结果

(四)讨论

(五)结论

参考文献

(一)综述 左心耳结构数据测量方法应用于经皮左心耳封堵术的研究进展

攻读学位期间发表论文情况

致谢