雄激素受体信号通路对神经母细胞瘤的调节作用

摘要

背景：神经母细胞瘤（neuroblastoma）是儿童最常见的发生在颅外的实体肿瘤。其主要起源于肾上腺，也可起源于肾上腺以外的交感神经的其他部分，包括腹膜后或胸部。迄今导致神经母细胞瘤发病的原因还不十分清楚,但是有些遗传易感性因素被发现与神经母细胞瘤的发病有关。目前关于神经母细胞瘤的许多研究都在试图寻找有效的治疗这种恶性肿瘤的方法。虽然之前的一些报道已经表明雄激素受体(AR)在神经母细胞瘤细胞中有表达,但是雄激素受体在神经母细胞瘤中的生物学作用并不完全清楚。本研究将就雄激素受体信号通路对神经母细胞瘤的调节作用进行探讨。并初步对中药制剂复方木鸡颗粒对神经母细胞瘤的作用进行观察。
　　方法:
　　1.Western blot蛋白印迹法检测雄激素受体（androgen receptor AR）在神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,Neuro-2a）及其他细胞系以及转染siRNA AR后的蛋白表达水平。
　　2.MTT法检测雄激素（R1881）、雄激素受体拮抗剂（MDV3100，ARN509）对神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,Neuro-2a）增殖能力的影响;同时检测中药复方木鸡颗粒对两种不同细胞系293T(人肾上皮细胞系)和神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y的IC50值的差异性。
　　3.划痕法检测雄激素（R1881）、雄激素受体拮抗剂（MDV3100，ARN509）对神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,Neuro-2a）迁移能力的影响。
　　4.Transwell法检测不同处理对神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y）侵袭能力的影响;
　　5.3D成球实验和软琼脂集落形成实验检测不同处理对神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,Neuro-2a）细胞球体形成能力的影响;
　　6.裸鼠体内种植神经母细胞瘤细胞系 Neuro-2a(N2a)，检测雄激素在体内对神经母细胞瘤的影响。
　　结果:
　　1.在神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,N2a）检测出雄激素受体（AR）有高表达；
　　2.雄激素促进而雄激素受体拮抗剂抑制体外神经母细胞瘤（SH-SY5Y,N2a）的增殖；
　　3.雄激素促进而雄激素受体拮抗剂抑制神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,N2a）的迁移能力；
　　4.雄激素促进而雄激素受体拮抗剂抑制神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y）的侵袭能力；
　　5.雄激素促进神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y,N2a）细胞球体形成而雄激素受体拮抗剂抑制细胞球体形成的能力；
　　6.雄激素促进神经母细胞瘤在裸鼠体内（N2a）的生长。
　　7.复方木鸡颗粒处理后的293T和SH-SY5Y的IC50值有显著学差异。
　　结论：研究结果表明，雄激素受体信号通路可能参与了神经母细胞瘤的进展，并且这一发现可能为神经母细胞瘤患者的诊断和治疗提供新的靶点。复方木鸡颗粒在体外能抑制神经母细胞瘤（SH-SY5Y）生长，但其具体的作用机制还需要进一步的研究。

目录

声明

前言

材料与方法

1.材料

2.方法

3. 统计学处理

结果

1.在神经母细胞瘤细胞系 SH-SY5Y and Neuro-2a 中检测出雄激素受体(AR)有高表达

2.R1881促进神经母细胞瘤在体外的增殖而雄激素受体拮抗剂抑制神经母细胞瘤在体外的增殖

3.雄激素及雄激素受体拮抗剂对神经母细胞瘤细胞系迁移能力的影响

4.雄激素及雄激素受体拮抗剂对神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)的侵袭能力的影响

5.雄激素及雄激素受体拮抗剂对神经母细胞瘤细胞系细胞球体形成能力的影响

6.雄激素对小鼠体内种植神经母细胞瘤细胞系Neuro-2a (N2a)生长的影响

讨论

结论

参考文献

综述:神经母细胞瘤的信号通路的研究进展

攻读学位期间发表论文情况

致谢