肺积宁方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及下调VEGF表达的实验研究

摘要

目的：探讨肺积宁方对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子(VEGF)基因蛋白表达的影响。 方法：体外培养A549细胞，选择不同浓度肺积宁含药培养基与人肺癌细胞共同孵育72h后，应用倒置相差显微镜、荧光显微镜观察细胞生长状况和凋亡细胞形态变化，采用MTT法检测细胞生长抑制率、PI/AnnexinV-FITC双染法检测细胞凋亡率、ELISA法检测细胞上清液中VEGF含量变化。 结果：经MTT实验测定，肺积宁方各浓度对人肺腺癌A549细胞的增殖均有显著的抑制作用，呈良好的量效关系。肺积宁方对A549细胞IC50是200mg/ml，我们选用了30mg/ml，100mg/ml，200mg/ml，1100mg/ml四个浓度作为本实验的四个剂量组，作用时间为72h。在倒置显微镜下观察细胞生长状态，对照组细胞贴壁生长状态良好，但随着作用浓度的增加，细胞由贴壁生长而逐渐脱落，外形变圆，体积缩小，细胞间距增大，折光性增强。PI/AnnexinV-FITC双染，流式细胞仪下检测细胞凋亡率，可测得本方可以诱导A549细胞凋亡，并随着药物浓度的增大，凋亡细胞的数量逐渐增加。经X2检验，四个浓度剂量组的细胞凋亡率均高于正常对照组，差异性显著(P＜0.05)；高浓度剂量组(1100mg/ml)处理后细胞凋亡率(44.8％)明显高于对照组(4.3％)，p＜0.01。经PI/AnnexinV-FITC双染，在荧光显微镜下，可见部分细胞的细胞核呈大小不等、形态不规则的碎片状或梅花状，为典型的细胞凋亡形态，并随着浓度增加，每视野下的凋亡细胞增加。各剂量组均可使VEGF基因蛋白表达下调，呈明显的量效关系，当浓度为200mg/ml和1100mg/ml时，与对照组相比，差异性显著(p＜0.01)。 结论：肺积宁方能抑制人肺腺癌A549细胞增殖，其抑制作用可能是通过诱导细胞凋亡和下调VEGF基因蛋白表达来实现的。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文名词术语对照

前 言

1实验材料

2实验方法

3统计方法

4实验结果与分析

讨论

结论

参考文献

致 谢

综 述中西医结合治疗非小细胞肺癌的研究进展

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