曲札茋苷在大鼠体内的药代动力学研究

摘要

曲札茋苷是从廖科植物拉萨大黄干燥根或根茎中提取的有效成分之一，其化学名为3,5,3',4'?四羟基茋?3'?O?β?葡萄糖苷，属于二苯乙烯苷类化合物。研究表明曲札茋苷具有抗炎、抗动脉硬化、肺保护等多种药理活性。本文采用HPLC?UV法进行曲札茋苷含量测定及有关物质检测，采用HPLC?HRMS法进行其在大鼠体内的药代动力学研究，为其进一步研究提供理论依据。 本文以拉萨大黄药材为原料，确立了曲札茋苷的制备工艺，以D101型大孔吸附树脂为固定相进行初步纯化，以反向C18填料进一步纯化获得曲札茋苷原料药。建立HPLC?UV法对曲札茋苷进行含量测定，色谱柱为Agilent Zorbax SB?C18柱（150×4.6mm，5μm），流动相为乙腈–水（19∶81,v/v）。试验结果表明曲札茋苷在2~20μg·mL?1浓度范围内表现出良好的线性相关性（r=0.9999）；平均回收率在100~103%范围内，仪器精密度（RSD）为1.12%；采用外标一点法按照峰面积计算，三批曲札茋苷原料药（批号：180420，180506，180515）含量分别为100.51%，100.21%和99.68%。 本文建立HPLC?UV法考察了强氧化、高温及不同pH及光照强度条件下曲札茋苷的稳定性，对曲札茋苷有关物质进行了检测。曲札茋苷在强碱性条件下不稳定，离子强度的增加会使其降解速率增加；在光照条件下不稳定，降解速率随着光照强度的增加而增加，并与时间呈现线性相关；在高温、酸性及氧化条件下稳定。三批曲札茋苷原料药中主要含有三个杂质，含量分别为0.11%，0.13%和0.02%，杂质总含量为0.27%。 本文首次建立HPLC?HRMS定量分析方法测定曲札茋苷在大鼠血浆中的浓度并进行了完全的方法学验证。结果表明大鼠血浆中曲札茋苷在5~500ng·mL?1浓度范围内表现出良好的线性相关性（r=0.9983），定量下限为5ng·mL?1；日内和日间精密度均＜6.71%，准确度在?2.00~6.74%范围内；基质效应和回收率均符合要求；稀释可靠性试验中，分别将样品稀释30和900倍，精密度和准确度均＜±15%。将曲札茋苷以低、中、高（1.25,3.75,11.25mg·kg?1）三个给药剂量经尾静脉注射给药后，考察其在大鼠体内的药代动力学行为。采用非房室模型获得曲札茋苷在大鼠体内的药代动力学参数如下：AUC0-∞分别为6370.56±1899.74，1948.94±598.20和577.24±83.50h·ng·mL?1；MRT分别为0.20±0.03，0.18±0.03，0.20±0.04h；Vss分别为0.39±0.15，0.37±0.09和0.44±0.11L·kg?1。结果表明，曲札茋苷在大鼠体内分布广泛且消除速率较快并呈现线性动力学。

目录

声明

引言

1 文献综述

1.1 药代动力学

1.1.1 基本概念

1.1.2 药物的体内过程

1.2 液相色谱-质谱联用技术在药代动力学研究中的应用

1.3 生物样品前处理方法

1.4 二苯乙烯苷类化合物概述

1.4.1 药理作用

1.4.2 药代动力学研究概述

1.5 本论文的立题依据和主要研究内容

2.1 实验仪器与材料

2.1.1 仪器

2.1.2 药品与试剂

2.2 拉萨大黄药材中曲札茋苷的提纯分离

2.2.2 反向C18柱层析纯化曲札茋苷的工艺研究

2.3 曲札茋苷含量测定

2.3.1 HPLC含量测定分析方法

2.3.2 溶液配制

2.3.3 分析方法验证

2.4 结果与讨论

2.4.1 HPLC分析方法的建立

2.4.2 分析方法验证

2.4.3 含量测定结果

2.5 本章小结

3 曲札茋苷的有关物质检测

3.1 实验材料和仪器

3.1.1 仪器

3.1.2 药品与试剂

3.2 实验方法

3.2.1 HPLC有关物质检测分析方法

3.2.2 溶液的配制

3.2.3 分析方法验证

3.2.4 曲札茋苷光照及碱性条件降解速率试验

3.3 结果与讨论

3.3.1 分析方法验证

3.3.2 曲札茋苷光照及碱性条件下的降解动力学

3.3.3 曲札茋苷有关物质检测结果

3.3.4 曲札茋苷有关物质结构鉴定

3.4 本章小结

4.1 实验材料和仪器

4.1.1 仪器

4.1.2 药品与试剂

4.1.3 动物

4.2 实验方法

4.2.1 药液配制

4.2.2 血浆样品采集

4.2.3 血浆样品前处理

4.3 定量分析方法的建立

4.3.1 分析方法

4.3.2 定量分析方法验证

4.4 结果与讨论

4.4.1 检测条件优化

4.4.2 定量分析方法验证结果

4.4.3 药动学测定结果

3.5 本章小结

结论

参考文献

附录A 缩略语说明

致谢

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