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【6h】

皮肤切创愈合过程中TLR2、TLR4表达及其法医学意义

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第一章前言

第二章材料与方法

2.1材料

2.1.1主要仪器设备

2.1.2实验动物

2.1.3主要试剂

2.2方法

2.2.1实验动物分组

2.2.切创动物模型制作及取材

2.2.3常规HE染色

2.2.4免疫组织化学染色(SP法)及结果判断

2.2.5阳性细胞计数与统计学处理

第三章结果

3.1损伤组织修复过程中的病理学改变

3.2 TLR2、TLR4的表达

3.2.1对照组

3.2.2损伤组

3.2.3 TLR2阳性细胞比率

3.2.4 TLR4阳性细胞比率

第四章讨论

4.1小鼠皮肤切创损伤组织修复过程中的病理学改变与损伤时间的关系

4.2皮肤切创组织中单核-巨噬细胞TLR2和TLR4阳性表达与损伤时间关系

第五章结论

致谢

参考文献

附图

综述 生前伤与死后伤鉴别的法医学研究进展

攻读硕士学位期间的研究成果

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摘要

目的:实验观察皮肤切创组织中单核-巨噬细胞TLR2和TLR4阳性表达与损伤时间变化的关系及其规律,探讨精确推断损伤时间的新方法。 方法:采用小鼠皮肤切创损伤动物模型,免疫组织化学法观察不同损伤时间小鼠皮肤切创组织中单核-巨噬细胞TLR2、TLR4的阳性表达情况。Km小鼠48只,按切创时间分为0h,1h,3h,6h,12h,1d,2d,3d,4d,5d,6d,7d,8d,9d,10d共15个实验组,每组3只,另3只无损伤小鼠作正常对照,按损伤时间依次处死动物,取材作常规组织病理学和免疫组织化学观察。 结果:皮肤切创组织中单核-巨噬细胞TLR2和TLR4的阳性表达与组织病理学分期有关,呈双相变化。在组织损伤的炎症期,两者随损伤时间的延长而逐渐升高,分别在伤后第5d和第3-4d到达高峰,之后又随损伤时间的进一步延长而逐步下降。单核-巨噬细胞TLR2、TLR4阳性细胞比率(单核-巨噬细胞阳性细胞数与中性粒细胞、单核-巨噬细胞及成纤维细胞三种阳性细胞总数之比率)与损伤时间的回归方程分别为Y1=23.8099+0.9572X-0.0077X2+1.5 × 10-5X3(R2=0.872):Y2=25.2256+0.7893X-0.0059X2+1.0×10-5X3(R2=0.879),其中X为损伤时间,Y1、Y2分别为TLR2、TLR4阳性细胞比率。 结论:在小鼠皮肤切创愈合过程中,损伤组织内单核-巨噬细胞TLR2、TLR4的阳性表达比率与损伤时间呈双相变化关系;结合不同损伤时间的组织病理学变化特点,检测损伤区单核-巨噬细胞TLR2、TLR4的表达可望成为精确推断组织损伤时间的新方法,值得进一步探讨。

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