改良HTK液及其与铁离子螯合剂去铁敏与LK614联用对大鼠肝脏保存作用的评估

摘要

目的：利用大鼠原位肝移植模型研究器官保存液对肝脏的缺血-再灌注性损伤的保护作用，并评估去铁敏联合LK-614在器官保存液中的对肝脏的保护效果。 方法：大鼠的肝脏分别保存在三种不同的器官保存液中-HTK液，修饰的mHTK液(减少HTK液中组氨酸的浓度并加入N-乙酰组氨酸，并增加几种细胞基本氨基酸如甘氨酸，丙氨酸和天冬氨酸)及加入去铁敏和LK-614的mHTK液(mHTK++).实验分A、B两类共六组：A类三组A1，A2，A3的肝脏分别保存在HTK，mHTK，mHTK++三种保存液中4℃-16小时后再植入受体大鼠，B类三组B1，B2，B3的肝脏冷保存20hr后再移植，观察术后28天生存率。计算存活率并检测28天的肝功能生化指标：转氨酶(如GOT，GPT)和乳酸脱氢酶，凝血酶原时间，碱性磷酸酶及门静脉压等。通过比较长期存活率及其相应肝功能来评价这三种保存液对大鼠肝脏的冷保存损伤的保护效果。 结果： 1、对比六组结果，加入去铁敏和LK-614提高了大鼠术后的长期存活率，A类三组(即A1-A3)中的存活率分别是8/10，6/9，5/6。在B类三组(即B1-B3)中它们的长期存活率都下降了，分别是：2/7，2/9，3/8。 2、对比相应肝功能的生化指标值，加入去铁敏和LK-614的mHTK++液组在乳酸脱氢酶和转氨酶比其他两组低，但无统计学意义。 结论： 1、三种器官保存液都成功保护了长期冷缺血的肝脏。 2、mHTK液对肝脏的保护未高于传统的HTK液。加入去铁敏和LK-614的mHTK++液对肝脏的保护效果也并不非常明显。 3、虽然去铁敏在肝细胞培养中效果显著，在器官水平，它及它与LK-614联合的效果和它们的浓度还有待于进一步研究。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章引言

1.1冷保存诱导损伤的细胞及分子机制

1.1.1低温低氧条件下细胞内离子稳态的改变

1.1.2低温诱导的线粒体通透性改变（Mitochondria Permeability Transition,MPT）及细胞凋亡

1.1.3活性性氧物质(ROS)介导的细胞损伤

1.1.4冷保存诱发的，可螯合性铁离子在冷保存损伤过程中的关键作用

2.1器官保存液及其毒性作用

第2章 材料与方法

2.1实验设计

2.2材料

2.2.1 实验动物

2.2.2保存液

2.3方法

2.3.1手术方法

2.3.2取标本及样品

2.3.3生化指标测定

2.4统计学分析

第3章结果

3.1 16小时冷缺血后移植的生存率

3.2 20小时冷缺血后移植的生存率

3.3 16hr冷缺血后肝细胞受损程度

3.4 20hr冷缺血后肝细胞受损程度

第4章讨论

第5章结论与展望

致谢

参考文献

附录A 线粒体/细胞色素C介导的凋亡通路的研究进展

攻读学位期间的研究成果