浅蓝菌素通过线粒体途径诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡的研究

摘要

目的: 探讨浅蓝菌素诱导骨肉瘤细胞株U2-OS凋亡的可能信号传导通路。 方法: 采用Western blotting检测Cerulenin处理后骨肉瘤细胞株U2-OS中线粒体传导通路相关蛋白Bcl-2和Bax表达变化情况。①药物浓度组分别用2.5mg/l、5.0mg/l、10.0mg/l、20.0mg/l浓度的Cerulenin作用于骨肉瘤细胞株U2-OS24h后终止培养；②时间组：根据MTT实验所得IC50选用5.0mg/l的Cerulenin分别作用骨肉瘤细胞株U2-OS24h、48h、72h后终止培养；单去污细胞裂解液提取蛋白，分光光度计进行蛋白定量调整样本总蛋白量相等，进行Westernblotting实验。图像结果采用Bandscan5.0图像分析软件分析。 结果: ①药物浓度组2.5mg/l、5.0mg/l、10.0mg/l、20.0mg/l浓度的Cerulenin作用于骨肉瘤细胞株U2-OS24h，随着浅蓝菌素浓度的增加Bcl-2的表达量逐渐减少而Bax的表达量逐渐增加；时间组5.0mg/l的Cerulenin分别作用骨肉瘤细胞株U2-OS24h、48h、72h后随着时间的延长Bcl-2的表达量逐渐减少、Bax的表达量逐渐增加。 结论: 骨肉瘤细胞株U2-OS中Bcl-2和Bax阳性表达；Cerulenin作用于U2-OS后随着浓度的增加或处理时间的延长Bcl-2表达量减少而Bax表达量增加；相反，Cerulenin浓度降低或作用时间缩短Bcl-2表达量增加而Bax表达量降低。Cerulenin在诱导U2-OS细胞凋亡中，影响了Bcl-2和Bax的表达，推论Cerulenin可能是通过线粒体途径诱导骨肉瘤细胞株U2-OS发生凋亡的。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章引言

第2章材料与方法

2.1实验材料

2.1.1细胞株

2.1.2主要试剂与材料

2.2常用试剂的配置

2.2.1母液的配置

2.2.2使用液的配置

2.2.3主要仪器设备

2.3实验方法

2.3.1细胞培养

2.3.2细胞复苏、换液

2.3.3细胞传代

2.3.4细胞冻存

2.3.5细胞增殖抑制实验(MTT法)

2.3.6实验分组

2.3.7蛋白样本提取、定量

2.3.8免疫印迹

2.3.9图像结果分析

第3章实验结果

第4章讨论

第5章结论

致谢

参考文献

附图

综述脂肪酸合成酶及其抑制剂与肿瘤

攻读学位期间的研究成果