动态高压微射流技术制备中链脂肪酸纳米脂质体及其性质的研究

摘要

中链脂肪酸(MCFAs)具有吸收快、易供能和抑制体内脂肪蓄积等优点,但过量摄入会引发恶心、刺激胆囊素分泌和胃肠道不适等状况。脂质体作为一种优良的可生物降解性载体,可以提高药物的生物利用率。
　　 本课题以 MCFAs为油溶性模型材料,采用动态高压微射流(DHPM)作为核心技术,结合薄膜分散法和冻融法,通过工艺优化,制备薄膜分散-DHPM法的MCFAs纳米脂质体Ⅰ和DHPM-冻融法的MCFAs纳米脂质体Ⅱ,并且研究了这两种脂质体的物理化学性(粒径,多分散系数,zeta电位,包封率,载药量,外观形貌,DSC,渗漏率,表面张力,长期贮藏稳定性)和生理功能性(易供能性和抑制体内脂肪蓄积性)。
　　 本课题建立了MCFAs体外分析方法:得到MCFAs含量为95.94％,辛酸与癸酸的质量比为5:4；确定了MCFAs脂质体包封率的测定方法为离心-正已烷萃取分离游离药物、碱法甲酯化MCFAs、气相色谱测定包封率。
　　 制备了MCFAs纳米脂质体Ⅰ和Ⅱ,研究了各个配方因素和工艺因素,结果表明,MCFAs纳米脂质体Ⅰ的最优配方和工艺为:脂质浓度是8％,MCFAs浓度为15mg/mL,磷脂与胆固醇质量比为6:1,吐温-80浓度为30％,PBS浓度是O.05mol/L,PBS的pH值为7.4,脂质体的制备温度为40℃,处理压力是140MPa,处理次数为4次。MCFAs纳米脂质体Ⅱ的最优配方和工艺为:冷冻保护剂为麦芽糖,冷冻保护剂用量为3％,冻融次数为3次,冷冻时间为0.5h,融化温度为40℃。两种方法的精密度均较高。
　　 对MCFAs纳米脂质体Ⅰ和Ⅱ进行了性质表征和质量评价,结果表明,MCFAs脂质体Ⅰ较好:外观形貌呈球形或椭球形,粒度为76.2±1.2nm,zeta电位为-50.51±0.4mV,分散系数为0.207±0.003,EE为70.5±6.5％,载药量为9.4±0.4％,表面张力为33.86±0.36dyne/cm,相变温度为138℃,渗透率低、长期贮藏稳定性好。
　　 研究了MCFAs纳米脂质体Ⅰ和Ⅱ的易供能性。结果表明:用MCFAs纳米脂质体Ⅰ和Ⅱ灌胃小鼠,相比正常组,两种脂质体的高剂量组均可以显著提高小鼠负重游泳时间(分别为104±29min和105±31min)和肝糖原浓度(分别为16.40±1.45mg/g和14.98±3.56mg/g),可明显降低血清尿素氮(分别为891.5±113.4mg/L和839.5±111.9mg/L)和血乳酸(分别为6.05±1.40mmol/L和5.70±1.02mmol/L);另外,MCFAs组与两种MCFAs纳米脂质体组间没有显著性差异。
　　 研究了MCFAs纳米脂质体Ⅰ和Ⅱ的抑制体内脂肪蓄积性。结果表明:用MCFAs纳米脂质体Ⅰ和Ⅱ灌胃小鼠两周(短期)和五周(长期),与正常组相比,两种脂质体对小鼠体重、粮食摄入量、脂肪重量和肝脏重量均无显著差异,但对TG(分别为0.550±0.140 mmol/L和0.384±0.150 mmol/L)、TCH(分别为0.621±0.097和0.540±0.247)有显著性差异；另外,MCFAs组与两种MCFAs纳米脂质体组问并无显著性差异。
　　 总之,用薄膜分散-DHPM法和DHPM-冻融法制备的两种MCFAs纳米脂质体物理化学性状稳定,既克服了MCFAs自身的弱点,易供能性和抑制体内脂肪积蓄性又与单独使用MCFAs时没有显著性差异,可作为一种潜在的易供能产品和治疗肥胖症的膳食营养素。