γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对膀胱癌上皮—间质转化(EMT)的影响

摘要

目的:探寻Notch信号通路在膀胱癌上皮-间质转化(EMT)中的作用及其分子机制。
　　方法:通过倒置显微镜观察γ分泌酶抑制剂对人膀胱癌细胞T24、5637、J82生长和形态的影响;利用RT-PCR和Western blot在基因和蛋白水平上检测经γ分泌酶抑制剂处理前后人膀胱癌细胞T24、5637、J82中EMT分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Alpha-smooth muscle actin的表达变化;采用MTT比色法检测γ分泌酶抑制剂对人膀胱癌细胞T24、5637、J82细胞耐药性的变化;利用Transwell检测经γ分泌酶抑制剂处理前后人膀胱癌细胞T24、5637、J82侵袭能力的改变。
　　结果:RT-PCR和Western blot均显示经γ分泌酶抑制剂处理后使EMT分子标志物E-cadherin表达上调(P＜0.05)，N-cadherin、Vimentin、Alpha-smooth muscleactin表达下调(P＜0.05)，MTT结果显示经γ分泌酶抑制剂处理后对人膀胱癌细胞T24、5637、J82细胞生长明显被抑制(P＜0.05)，Transwell检测显示经γ分泌酶抑制处理后人膀胱癌细胞T24、5637、J82穿过微孔膜的细胞数明显减少(P＜0.05)。
　　结论:γ分泌酶抑制剂可明显抑制膀胱癌细胞的生长，Notch信号通路被阻断后使膀胱癌细胞中EMT分子标志物E-cadherin表达上调，N-cadherin、Vimentin、Alpha-smooth muscle actin的表达下调，抑制EMT的产生，影响膀胱癌细胞的生长、侵袭力、耐药性。

目录

声明

摘要

中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 细胞株来源

2．1．2 主要试剂

2．1．3 主要仪器与设备

2．2 实验方法及步骤

2．2．1 细胞培养

2．2．2 RT-PCR方法检测膀胱癌细胞E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin的表达变化

2．2．3 Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin的表达变化

2．2．4 MTT比色试验检测细胞耐药性变化

2．2．5 Transwell检测膀胱癌细胞侵袭能力的改变

2．3 统计学处理

第3章 结果

3．1 倒置显微镜下γ分泌酶抑制剂对膀胱癌细胞T24、5637、J82的影响

3．2 RT-PCR检测EMT分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Alpha-smooth muscle actin的表达变化

3．3 Western blot检测EMT分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Alpha-smooth muscle actin的表达变化

3．4 MTT比色试验检测细胞耐药性的变化

3．5 Transwell检测膀胱癌侵袭力的变化

第4章 讨论

4．1 膀胱癌的研究进展

4．2 Notch与癌症的关系

4．3 EMT与癌症的关系

4．4 Notch信号通路在肿瘤EMT中的研究状况

第5章 结论与展望

5．1 结论

5．1 进一步工作的方向

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述