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四种抗骨质疏松药物对人血管平滑肌细胞及人成骨肉瘤MG-63细胞内基质Gla蛋白表达的影响

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摘要

中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 主要材料及试剂

2.1.1 实验细胞

2.1.2 主要试剂、产地

2.1.3 主要仪器设备和产地

2.2 实验方法

2.2.1 细胞培养用品及液体的配制

2.2.2 细胞培养

2.2.3 各种骨质疏松治疗药物干预

2.2.4 人血管平滑肌细胞及人成骨肉瘤MG-63细胞基质Gla蛋白的检测

2.2.5 数据处理

第3章 结果

3.1 传代人血管平滑肌细胞和人骨肉瘤MG-63细胞的形态学观察

3.2 四种骨质疏松治疗药物对人血管平滑肌细胞基质Gla蛋白表达的影响

3.3 四种骨质疏松治疗药物对入骨肉瘤MG-63细胞基质Gla蛋白表达的影响

第4章 讨论

4.1 抗骨质疏松药物与动脉钙化

4.2 MGP与骨质疏松

第5章 结论与展望

5.1 结论

5.2 进一步工作的方向

致谢

参考文献

综述 MGP与动静脉畸形

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摘要

目的:观察四种抗骨质疏松治疗药物(维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿伦膦酸盐)对人血管平滑肌细胞及人MG-63细胞基质Gla蛋白,探讨MGP在骨质疏松发病中的可能作用及骨质疏松治疗药物对预防动脉硬化的可能作用。
  方法:⑴选取人血管平滑肌细胞及经典的具有成骨细胞表型特征的成骨细胞模型人成骨肉瘤MG63细胞进行传代培养。⑵分别给予不同浓度的维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿伦膦酸盐干预培养24h:维生素K2(10-7、10-6、10-5mol/L),活性维生素D3(10-10、10-9、10-8mol/L),PTH(10-9、10-8、10-7mol/L),阿伦膦酸盐(10-6、10-5、10-4mol/L),每种药物均设立空白对照。⑶培养24h后抽提血管平滑肌细胞及MG-63细胞总蛋白,采用Western-Blot方法检测血管平滑肌细胞及MG-63细胞中基质Gla蛋白表达的变化。
  结果:①维生素K2、活性维生素D3、PTH、阿伦膦酸盐对人血管平滑肌细胞基质Gla蛋白表达的影响:维生素K2、活性维生素D3、PTH、阿伦膦酸盐均可上调人血管平滑肌细胞基质Gla蛋白的表达,并且随着药物浓度呈梯度增高,MGP蛋白的表达亦明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。②维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿伦膦酸盐对人成骨肉瘤MG-63细胞基质Gla蛋白表达的影响:维生素K2、活性维生素D3、PTH、阿伦膦酸盐均可上调人成骨肉瘤MG-63细胞基质Gla蛋白的表达,并且随着药物浓度呈梯度增高,MGP蛋白的表达亦明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。
  结论:Western-Blot技术证实骨质疏松药物可影响人血管平滑肌细胞中MGP的表达,同时证实MGP在人成骨肉瘤MG-63细胞中有表达。骨质疏松治疗药物维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿伦膦酸盐均可促进血管平滑肌细胞和MG-63细胞基质Gla蛋白的表达,且呈剂量依赖性。骨质疏松治疗药物可能成为动脉硬化预防和治疗的新研究方向,同时MGP可能成为骨质疏松治疗药物作用的靶点,参与了骨质疏松的发病机制。

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