痰热清注射液对小鼠内毒素性急性肺损伤保护作用的实验研究

摘要

目的：观察痰热清注射液(TRQ)对小鼠内毒素(Lipopolysccharide，LPS)性急性肺损伤(Acutelunginjury，ALI)时肺指数、动脉血气分析、血清NO含量及Caspase-3(Cysteinyl aspartatespecific proteinases-3，Caspase-3)蛋白表达变化等的影响，探讨TRQ对ALI的保护作用及其机制。
　　方法：健康清洁的ICR小鼠30只（雌雄不拘，5周龄，体重20～25g），按完全随机分为以下三组（每组10只）：生理盐水(Normal saline,NS)组；LPS致急性肺损伤组(ALI组)；LPS+TRQ治疗组（TRQ组）。ALI组和TRQ组以气管内滴注(LPS4mg/kg，2ul/g)制备急性肺损伤模型，TRQ组在气管内滴注LPS的同时，立即给予TRQ4ml/kg尾静脉注射。3组均选给药后6h为观测点，观察每组肺指数、血清NO含量及动脉血气分析的结果;观察肺组织病理形态学改变;免疫组织化学检测肺Caspase-3的蛋白表达情况。
　　结果：⑴一般表现:滴注药物6h后，NS组未见异常变化;ALI组小鼠蜷缩，畏寒怕冷，呼吸频率明显加快，并逐渐出现呼吸窘迫症状，甚至出现紫绀;TRQ组呼吸频率加快、幅度加深，但无紫绀出现。⑵肺指数结果:ALI组肺指数高于NS组(P＜0.05);与ALI组相比较，TRQ组肺指数降低(P＜0.05); TRQ组与NS组肺指数比较，两者无统计学差异(P＞0.05)。⑶动脉血气分析测定:NS组、ALI组和TRQ组的PH值，比较无统计学差异(P＞0.05); ALI组Pa02较NS组显著下降(P＜0.01);与ALI组相比较，TRQ组Pa02明显升高(P＜0.05); TRQ组与NS组PaO2比较，两者无统计学差异(P＞0.05)。⑷血清中NO含量测定:与NS组比较，ALI组和TRQ组的血清NO含量升高(P＜0.01);与ALI组相比较，TRQ组血清NO含量显著降低(P＜0.01)。⑸肺组织病理形态学改变:光镜下NS组肺泡管和肺泡壁结构完整，肺泡腔内光洁，肺泡壁及间质内无炎性细胞浸润;ALI组病理改变明显，肺泡间隔增宽，肺泡腔变窄，可见炎性细胞渗出，以中性细胞和淋巴细胞为主;TRQ组病理改变较轻，肺部间隔稍增宽，肺泡稍窄，小部分肺泡及血管壁周围有淋巴细胞浸润，损伤程度较ALI组明显减轻。⑹肺组织Caspase-3表达变化:NS组肺组织中caspase-3表达很少。ALI组肺组织中caspase-3表达高于其它组，为强阳性。TRQ组肺组织中caspase-3表达高于NS组，低于ALI组，为弱阳性。与NS组比较，ALI组和TRQ组的Caspase-3表达阳性率升高(P＜0.01);与ALI组相比较，TRQ组Caspase-3表达阳性率显著降低(P＜0.01)。⑺肺指数与血清NO含量之间相关性分析:肺指数的变化与血清NO含量之间存在正相关性(r=0.516，P=0.003，P＜0.001)。⑻动脉血氧分压与血清NO含量之间相关性分析:动脉血氧分压的变化与血清NO含量之间存在负相关性(r=-0.545，P=0.002，P＜0.01)。
　　结论：①NO在LPS诱导的ALI的发病过程中起着重要作用。②TRQ对LPS诱导的ALI具有保护作用，可能是通过降低血清NO含量，下调Caspase-3蛋白的表达，从而减轻肺组织损伤。

目录

声明

摘要

缩略词对照表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2．1 实验动物

2．2 主要实验仪器设备

2．3 主要实验药品及试剂

2．4 主要试剂配制

2．5 实验动物分组

2．6 小鼠急性肺损伤(ALI)实验模型复制

2．7 各项指标测定和方法

2．7．1 血清NO含量变化

2．7．2 小鼠动脉血气分析

2．7．3 肺指数的测定

2．7．4 HE染色观察肺组织病理形态学改变

2．7．5 免疫组化检测Caspase-3的蛋白表达

2．8 统计学方法

第3章 实验结果

3．1 一般情况

3．2 各组肺指数结果的比较

3．3 各组动脉血气分析比较

3．4 各组小鼠血清中NO含量的变化

3．5 各组肺组织病理形态学改变

3．6 各组肺组织Caspase-3表达变化

3．7 肺指数、动脉血氧分压与血清NO含量之间进行相关性分析

3．7．1 肺指数与血清NO含量之间相关性分析

3．7．2 动脉血氧分压与血清NO含量之间相关性分析

第4章 讨论

4．1 急性肺损伤机制

4．2 TRQ及其作用机制

4．3 NO在ALI中的作用及TRQ对NO的影响

4．4 肺指数及TRQ对肺指数的影响

4．5 TRQ对血气分析结果的影响

4．6 Caspase-3凋亡细胞及TRQ对凋亡细胞的影响

第5章 结论

第6章 本研究不足之处

致谢

参考文献

附图

攻读硕士学位期间撰写及发表的学术论文

综述 急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征的治疗进展