耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药机制的研究

摘要

目的:
　　调查和研究南昌地区鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。
　　方法:
　　收集南昌大学第二附属医院2012年间临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌非重复株。使用 VITEK-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,纸片扩散法(K-B法)进行抗菌药物敏感性试验,三维试验检测 AmpC酶,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,采用聚合酶链反应(PCR)扩增blaIMP-1、blaIMP-2、blaIMP-4、blaVIM-2、blaNDM-1、blaSIM-1、blaADC、blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58及carO、adeB、adeS、adeR、intI1和ISAba1基因,并对阳性产物进行双向测序分析,确定其基因型。
　　结果:
　　2012年1月-12月共收集到84株耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌(CRAB),其对临床常用的12种抗菌药物有9种耐药率>90％,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低(44.0%),所有菌株均为多重耐药(MDR)株。三维试验在83株菌(98.8%)中检出AmpC酶,协同试验未检出产金属酶菌株。所有菌株均携带blaOXA-23、blaOXA-51及blaADC基因,1株携带blaOXA-58基因,未检测到blaOXA-24及金属酶基因(blaIMP、blaVIM-2、blaNDM-1及blaSIM-1);外排泵编码基因adeB、调控基因adeS和adeR的检出率分别为98.8%(83/84)、81.0%(68/84)和67.9%(57/84);所有菌株均检出外膜蛋白 carO基因;69株(82.1%)检测出I类整合酶基因(intI1),全部菌株携带插入序列ISAba1。
　　结论:
　　南昌地区 CRAB耐药性及多重耐药性非常严重,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为产生 OXA-23型碳青霉烯酶,AmpC酶、外排泵AdeABC、I类整合子和插入序列ISAba1可能与CRAB的多重耐药性密切相关。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

中英文缩略词表

第1章 引 言

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 菌株来源

2.1.2 主要仪器

2.1.3 主要试剂

2.2 方法

2.2.1 主要试剂的配置

2.2.2 引物设计与合成

2.2.3 药敏试验

2.2.4 耐药基因PCR扩增及序列分析

9.5μl

2.2.5 AmpC酶检测(三维试验)

2.2.6 金属β-内酰胺酶检测(EDTA协同试验)

2.2.7 细菌总RNA的提取

2.2.8 逆转录PCR（RT-PCR）

第3章 结果

3.1 药敏试验结果

3.2 β-内酰胺酶表型检测结果

3.3 β-内酰胺酶基因检测结果

3.4 外膜蛋白与外排泵基因检测结果

3.5 RT-PCR检测结果

3.6 整合子和插入序列检测结果

第4章 讨论

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述