应用环介导等温扩增技术对重症肺炎常见病原体诊断的回顾性研究

摘要

目的:
　　利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立呼吸道病原快速检测技术体系对重症肺炎进行研究,旨在提高多病原检测能力以指导诊疗方案,并与临床上常规病原菌检测方法(如痰培养)进行比较,探讨该方法的有效性及临床实用性,为病原学诊断和指导针对性用药提供快速、准确的新途径。
　　方法:
　　回顾分析2013年3月至2014年2月收治于南昌大学第一附属医院呼吸科和重症监护室的25例重症肺炎患者,利用LAMP方法根据患者病程分时间段检测患者下呼吸道标本,结果与痰培养进行比较。LAMP可同时检测检测12+1种细菌及非典型病原体,包括:肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽假单抱杆菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、结核杆菌及MRSA。根据LAMP检测结果了解重症肺炎住院患者的病原谱,并结合临床患者病情转归及治疗效果进行综合分析以了解此方法的有效性。探索 LAMP基因芯片检测技术应用于临床病原学检测指导抗菌药的新途径。
　　结果:
　　25例入选患者分时间段采集的标本共82份,LAMP的总检出率是70.7％,对混合感染的检出率是39.0%;痰培养的总检出率为63.4%,混合细菌的检出率为18.3%;LAMP对细菌的总检出率和混合感染的检出率均优于痰培养(P<0.05)。
　　根据 LAMP检测结果,重症肺炎住院患者的病原体以革兰阴性杆菌为主, MRSA的感染也日益增多且逐渐趋于社区获得。LAMP对非典型病原体的检测有一定的优势。LAMP还可以区分感染菌和定植菌,气管插管/切开会增加定植菌感染,气管插管/切开后最常见的定植菌是铜绿假单胞杆菌。重症肺炎住院患者初始治疗以联合治疗为主,使用最广泛的是碳青霉烯类抗生素。LAMP复查结果或许能反应临床治疗效果。
　　结论:LAMP作为新型的快速病原体检测技术与痰培养相比,能更快、更准确的为临床提供病原学诊断依据,并能区分病原菌和定植菌;LAMP检测结果观察到革兰阴性杆菌为重症肺炎的主要致病菌;
　　重症肺炎初始治疗以联合治疗为主,使用最广泛的是碳青霉烯类抗生素;LAMP复查结果或许能反应临床治疗效果。

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中英文缩略词表

第1章 前言

第2章 实验对象及方法

2.1 主要的实验仪器设备

2.2 主要试剂及来源

2.3 病例入选标准

2.4 病例排除标准

2.5 标本的采集

2.6 标本分装保存：

2.7 常规痰培养检测法

2.8 LAMP检测法

2.9 数据采集及统计学方法

第3章 结果

3.1 一般资料

3.2 合并症情况

3.3 LAMP法和常规培养法细菌检测阳性率

3.4 据LAMP检测结果分析我院重症肺炎患者病原菌感染情况

3.5 LAMP对定植菌的检出情况

3.6 临床治疗及治疗反应评估

第4章 讨论

4.1 重症肺炎的危险因素

4.2 根据LAMP检测分析感染病原谱

4.3 治疗及疗效评估

第5章 结论与展望

5.1 结论：

5.2 展望：

致谢

参考文献

综述

附录A 知情同意书