环介导等温扩增技术在下呼吸道感染常见病原体检测中的应用

摘要

目的：
　　应用环介导等温扩增(LAMP)方法对下呼吸道感染患者痰液常见致病菌进行核酸检测，同时与痰培养法比较，探讨该法在下呼吸道感染诊断中的应用价值，同以LAMP方法为手段，调查下呼吸道感染病原菌的分布。对初治已覆盖病原体组和初治未覆盖病原体组两组患者临床情况进行比较，证明快速病原检测的重要性。
　　方法：
　　收集福建省立医院呼吸科下呼吸道感染患者的合格痰标本289例，提取痰样品DN A进行等温扩增及实时荧光检测，结果进行数据分析呼吸科下呼吸道感染的病原菌分布，同时测试该检测体系的灵敏度和特异性；比较LAMP法与痰培养的结果。把检测结果>1×103的病例分为初治已覆盖病原体组和初治未覆盖病原体组，比较两组患者年龄、有无基础疾病、抗感染治疗天数、总住院天数、初治有效率以及治愈率。
　　结果：
　　1.该检测体系的灵敏度高、特异性好，289例患者中培养法阳性44例，阳性率15.2％。用LAMP方法检测以细菌浓度>1×103为界值，判定为阳性结果的有124例，阳性率43.0％。差异有显著性(P＜0.05)；2．呼吸科下呼吸道感染病原菌的分布，细菌占50.8％、非典型病原菌占14.2％；革兰阴性杆菌为主要致病菌，前四位依次为铜绿假单胞菌40株、流感嗜血杆菌34株、肺炎克雷白伯杆菌20株、肺炎链球菌20株。非典型病原体41株，其中肺炎支原体39株，肺炎衣原体2株。3.初治已覆盖病原体组和初治未覆盖病原体组患者总住院时间以及初治有效率有显著差别（P＜0.05)；但比较抗感染治疗天数以及治愈率，两者比较差异无统计学意义(P=0.960)。
　　结论：
　　LAMP方法可以快速扩增肺部感染患者痰液中常见致病菌核酸，检出率明显高于传统痰培养。,以细菌浓度>1×103为界值,其阳性率为43.0%,敏感度74.0%,特异度95.3%,敏感度明显高于痰培养。治疗前明确致病菌并进行针对治疗，可以缩短患者住院时间及提高初治的有效率。

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中文摘要

英文摘要

英文缩略词表

一、引言

二、研究对象与实验材料

一、研究对象：

二、实验材料

三、研究方法

（一）、实验方法

（二）、病原菌检测结果分析

（三）、疗效分析

四、结果

1、基本资料

2、痰培养结果

3、环介导等温扩增技术检测结果

4、环介导等温扩增方法对11种病原菌检测灵敏度和特异度的分析

5、对289份下呼吸道感染的病例中分析其疾病谱的构成

6、环介导等温扩增技术与痰培养检测细菌的比较

7、环介导等温扩增方法和培养法对各种病原菌检出率的比较

8、疗效分析

五、讨论

1、环介导等温扩增方法对下呼吸道病原菌检测课题研究的设计关键点

2 环介导等温扩增试验中的注意事项

3 关于环介导等温扩增方法检测阳性结果的判读

六、结论

参考文献

综述

参考文献

致谢