大鼠尿液中蝶呤类化合物及氨基酸分析新方法的研究

摘要

国内外文献表明，蝶呤类化合物及氨基酸对生物体新陈代谢有着重要的意义，人体体液中蝶呤类化合物或氨基酸含量的变化，有可能为癌症的早期诊断提供重要的参考价值。本文从生物体中蝶呤类化合物和氨基酸的分析技术、样品前处理以及两者与疾病相关性研究等方面进行了综述。在此基础上，建立了同时测定蝶呤类化合物和氨基酸的离子色谱荧光法和高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法，然后采用离子色谱荧光法对大鼠膀胱癌模型组和对照组进行尿液分析，寻找可能的膀胱癌肿瘤标志物。其主要研究成果如下：
　　1.建立了大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的离子色谱荧光分析法。大鼠尿液利用三氯乙酸除蛋白后，采用MCX固相萃取小柱进行净化，然后用离子色谱荧光法进行测定。3种物质的仪器检出限分别为0.08，0.3和0.002μmol/L，加标回收率在71.2％~121.7%之间，RSD小于11.7%。
　　2.建立了大鼠尿液中黄蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸的高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（HPLC-MS/MS）的分析方法。大鼠尿液除去蛋白后，稀释50倍直接进样分析，采用基质标准曲线法消除基质的影响。5种物质的仪器检出限分别为1.6，1.5，2.2，0.9和1.0 ng/mL，加标回收率在89.0%~107.0%之间，RSD在0.30%~5.19%之间。
　　3.将离子色谱荧光法应用于对照组和膀胱癌模型组大鼠尿液中色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的同时测定。测定结果显示3种物质在膀胱癌发生发展过程中呈现出不同的发展趋势，其中色氨酸和蝶呤-6-羧酸有可能成为膀胱癌潜在的标志物。

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第一章 绪论

1.1 前言

1.2 蝶呤类化合物的研究现状

1.3 氨基酸类化合物研究现状

1.4 本文研究的主要内容

参考文献：

第二章 离子色谱荧光法同时测定大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸

2.1 引言

2.2 实验部分

2.3 结果与讨论

2.4 结论

参考文献：

第三章 高效液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠尿液中可能的五种癌症标志物

3.1 引言

3.2 实验部分

3.3 结果与讨论

3.4 结论

参考文献：

第四章 大鼠尿液中酪氨酸、色氨酸和蝶呤-6-羧酸含量随膀胱癌发展变化的研究

4.1引言

4.2 实验部分

4.3 结果与讨论

4.4 结论

参考文献：

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果