大鼠视乳头部位活化的星形胶质细胞与PGE2/EP受体亚型的关系

摘要

目的：探讨视乳头部位星形胶质细胞活化后EP受体的表达特点及对星形胶质细胞的影响。
　　方法：原代培养视乳头星形胶质细胞：取3个月大的SD大鼠的眼球，在手术显微镜下分离出视乳头，将其切成2-3块放在含10％胎牛血清的普通培养基DMEM/F12中培养，待细胞从组织块爬出后去掉组织块，加入星形胶质细胞选择性培养基，然后把分离纯化星形胶质细胞，传代2次用GFAP作细胞鉴定；蛋白印迹法检测C57小鼠、SD大鼠以及正常人视网膜EP受体的表达；细胞免疫荧光分别检测未加药和加表皮生长因子EGF(20ng/ml)、NMDA(50UM)刺激后的星形胶质细胞EP受体的表达定位；采用蛋白印迹法检测EGF(20ng/ml)、NMDA（10、50、100、200um）刺激星形胶质细胞后COX-2、EP受体及GFAP的相对表达情况。
　　结果：经过3周左右的培养，纯化星形胶质细胞大约95%表达GFAP。蛋白印迹结果显示在C57小鼠、SD大鼠以及正常人视网膜EP2-4受体有表达；细胞免疫荧光结果显示，EP1受体表达在细胞胞膜，EP2和EP4受体在胞核表达，EP3在细胞质表达，加药刺激后受体表达定位并没有发生改变；EGF可以使星形胶质细胞活化使其形态发生变化，GFAP表达增加，并有统计学意义（P＜0.05）；EGF刺激细胞后，蛋白结果显示，COX-2被诱导生成，PGE2的四个受体表达都增加，并且具有统计学意义（P＜0.05）；NMDA刺激后，EP受体只有轻微表达变化，但没有统计学意义。
　　结论：EGF激活星形胶质细胞使PGE2的EP受体表达增加，参与星形胶质细胞活化反应。