富血小板血浆(PRP)凝胶结合像素铒激光在治疗大鼠皮肤光老化的实验研究

摘要

目的：
　　观察大鼠皮肤治疗前后皮肤肤质变化，真皮层厚度及结构，I型胶原纤维以及MMP-1、SOD变化情况，评价采用富血小板血浆（PRP）凝胶、像素铒激光治疗紫外线诱导的SD大鼠皮肤光老化的疗效，为临床上治疗光老化提供一种新方法。
　　方法：
　　采用健壮的雌性SD大鼠50只，分为5组，A组：正常对照组（不行任何干预）；B组：UV照射组；C组：UV照射+像素铒激光照射组；D组：UV照射+PRP凝胶注射组；E组：UV照射+PRP凝胶注射+像素铒激光照射组。经14周紫外线照射及4周的激光治疗及注射PRP的治疗后，肉眼观察各组大鼠背部皮肤情况；苏木精-伊红染色（HE）和Masson染色分别观察大鼠皮肤结构、真皮层的厚度和胶原纤维的排列情况；免疫组织化学染色及图像分析观察皮肤I型胶原表达情况；采用黄嘌呤氧化酶法测定皮肤组织SOD活性，Westernblot方法观察MMP-1表达。
　　结果：
　　（1）肉眼观：光老化大鼠皮肤肉眼观均表现为干燥、脱屑、皱纹明显、弹性下降、色素沉着。E组（UV照射+PRP凝胶注射+像素铒激光照射组）较B组（UV照射组）肉眼观大鼠皮肤弹性转好，皱纹明显减少，偶见动态性皱纹，无明显色素沉着，皮肤光滑，无脱屑。E组（UV照射+PRP凝胶注射+像素铒激光照射组）在上述方面较D组及C组稍好，D组及C组较B组均好，但D组与C组间无明显差异。
　　（2）免疫组化结果显示，各组皮肤组织中I型胶原阳性表达；B组较A组平均光密度值显著降低（P＜0.01），而经PRP凝胶注射治疗、像素铒激光治疗及（PRP凝胶注射+像素铒激光照射）治疗后平均光密度值显著增加（P＜0.05）。
　　（3）HE、Masson染色显示，C组（UV照射+像素铒激光照射组）、D组（UV照射+PRP凝胶注射组）较B组（UV照射组）表皮明显变薄，真皮厚度增加（P＜0.05）；E(UV照射+PRP凝胶注射+像素铒激光照射组)组真皮层厚度较B组相比，明显增厚，有显著差异性,（P＜0.01），但C、D两组无明显差异。
　　（4）Westernblot检测结果示，B组较A组MMP-1蛋白表达显著上升（P＜0.01），经PRP凝胶注射或铒激光照射后，C、D组较B组MMP-1蛋白表达明显下降，均具有统计学意义（P＜0.05），E组较C、D组MMP-1蛋白表达下降，具有统计学意义（P＜0.05），表明表明紫外线照射可显著上调MMP-1蛋白的表达；PRP凝胶注射及铒激光均可可下调MMP-1的表达，像素铒激光与PRP有协同下调MMP-1的表达作用。
　　（5）超氧化物歧化酶（SOD）检测结果示，B组较A组、E组相比，超氧化物歧化酶（SOD）显著降低（P＜0.01），C、D组较B组超氧化物歧化酶（SOD）活力较B组显著升高（P＜0.05）。
　　结论：
　　注射PRP凝胶、照射像素铒激光治疗皮肤光老化可有效地刺激皮肤中I型胶原蛋白表达，下调MMP-1蛋白表达，提高SOD酶的活性，促进皮肤胶原的合成，增加皮肤真皮层厚度，促进皮肤再生。照射像素铒激光与PRP在光老化的治疗上有协同作用。