类泛素蛋白ISG15对乙型肝炎病毒相关性肝癌细胞Hep3B的生物学行为的影响

摘要

目的：
　　研究乙型肝炎相关性肝癌细胞Hep3B在ISG15蛋白表达被干扰后，其增殖、迁移、侵袭、凋亡、周期的变化。
　　方法：
　　1、将表达shRNA的质粒转染入Hep3B细胞。2、干扰ISG15蛋白表达前后细胞增殖能力的改变情况利用CCK-8检测试剂及酶标仪进行检测。3、干扰ISG15蛋白表达前后细胞侵袭和迁移能力的变化利用Transwell小室及人造基底膜检验。4、干扰ISG15蛋白表达前后细胞凋亡特点和细胞周期的改变的检测通过流式细胞仪完成。
　　结果：
　　1、ISG15蛋白的表达被干扰后，Hep-3B细胞的增殖能力明显地受到抑制（P＜0.01）。2、干扰ISG15蛋白的表达导致Hep-3B细胞的迁移能力、侵袭能力均显著减弱（ P＜0.01）。3、干扰ISG15蛋白的表达能促进肝癌细胞凋亡（P＜0.01），而且以早期凋亡为主。4、ISG15蛋白的表达被干扰后，处于S期的Hep-3B细胞比例明显上升，G1期细胞比例降低（P＜0.01）；结合增殖实验的结果，表明细胞发生了S期阻滞。
　　结论：
　　ISG15蛋白与肝癌的发生发展关系密切，它能促进Hep3B细胞的增殖、迁移、侵袭，能抑制Hep3B细胞的凋亡。减少ISG15蛋白的表达可将细胞周期阻滞于S期。

目录

声明

中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计方法

第3章 结果

3.1 Western Blot检测shRNA干扰前后乙型肝炎病毒相关肝细胞癌细胞株Hep-3B中ISG15蛋白的表达水平

3.2 质粒表达shRNA干扰ISG15表达对细胞增殖的影响

3.3 质粒表达shRNA干扰ISG15表达对细胞迁移的影响

3.4 质粒表达shRNA干扰ISG15表达对细胞侵袭的影响

3.5 质粒表达shRNA干扰ISG15表达对细胞凋亡的影响

3.6 质粒表达shRNA干扰ISG15表达对细胞周期的影响

第4章 讨论

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述:ISG15蛋白功能以及在恶性肿瘤中的作用的研究