声明
第1章 引言
1.1 CDK1的研究现状及其意义
1.1.1 CDK1的结构与功能
1.1.2 CDK1在癌症中的作用
1.2去泛素化酶USP14的研究现状及其意义
1.2.1 USP14的结构和功能
1.2.2 USP14在癌症中的作用
1.3 乳腺癌的研究现状
第2章 敲低USP14对乳腺癌细胞的影响
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 试剂
2.2.2 仪器
2.2.3 细胞培养
2.2.4 细胞增殖实验
2.2.5 SiRNA 转染
2.2.6 克隆集落形成
2.2.7 蛋白质免疫印迹法（Western Blotting)
2.2.8 统计学分析
2.3 实验结果
2.3.1 去泛素化酶USP14在乳腺癌细胞中高表达
2.3.2敲低USP14的表达显著抑制乳腺癌细胞的生长和克隆集落的形成
2.4 讨论
第3章 敲低USP14对乳腺癌细胞周期运行和迁移能力的影响
3.1 引言
3.2 材料
3.2.1 实验仪器
3.2.2 实验材料和试剂
3.3 实验方法
3.3.1 划痕实验
3.3.2 Transwell实验
3.3.3荧光定量PCR
3.3.4 流式仪测细胞周期实验
3.3.5 统计学分析
3.4 结果
3.4.1 敲低USP14使乳腺癌细胞周期停滞于G2/M期，但不影响细胞凋亡
3.4.2 敲低USP14基因抑制乳腺癌细胞的迁移
3.5 讨论
第4章 USP14 去泛素化调控CDK1
4.1 前言
4.2 材料
4.2.1 仪器
4.2.2 试剂和材料
4.3 实验方法
4.3.1 质粒的构建
4.3.2 质粒转染（以六孔板为例）
4.3.3 免疫共沉淀
4.4 结果
4.4.1 敲低USP14影响细胞G2/M期相关蛋白的表达
4.4.2 USP14能够稳定CDK1的蛋白水平
4.4.3 USP14与CDK1相互结合并去泛素化稳定CDK1
4.5 讨论
第5章 主要的结论和展望
5.1 主要的结论
5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述:USP14在癌症中的作用及研究进展
