主要养殖对虾幼体及仔虾酶活力与中肠形态结构的研究

摘要

本实验研究了中国明对虾幼体和仔虾的胰蛋白酶、糜蛋白酶和淀粉酶，并对其蛋白质和核酸含量进行了研究。利用人工合成底物TAME和SAPFNA检测了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)幼体及仔虾的消化性蛋白酶(胰蛋白酶和糜蛋白酶)和淀粉酶的活性。结果表明，该虾幼体及仔虾具有胰蛋白酶和糜蛋白酶活力，丝氨酸蛋白酶抑制剂(PMSF)对蛋白酶的抑制作用体现为对糜蛋白酶的抑制，对胰蛋白酶没有抑制作用。中国明对虾个体发育中消化酶的变化趋势为：(1)糠虾期蛋白酶的比活力最高，无节幼体期最低，其中总蛋白酶和糜蛋白酶及胰蛋白酶的比活力分别在M3和M1达峰值；(2)淀粉酶的比活力在溞状幼体期(Z1)最大，M3也出现升高趋势，其余各期酶活性均较低；(3)M2各种消化酶的活性都很低。中国明对虾幼体前期水分含量逐渐增加，从Z3期趋于稳定；蛋白质含量的波动范围小。无节幼体变态成溞状幼体体重的变化率最大，Z3-M1期绝对变化率和相对变化率都很高，糠虾阶段变化率逐渐下降。在个体发育过程中，从无节幼体变态为溞状幼体时核酸含量发生剧烈变化，N4-Z1期DNA和RNA含量显著下降。溞状幼体和糠虾幼体期DNA含量略有增加，而在Z3-M1和M3-PL1变态中RNA含量总是增加。Z1和Z3期RNA和DNA的比值明显下降，其他发育期趋于稳定。

目录

摘要

第一章对虾类消化酶的研究

1.1前言

1.2消化酶种类

1.2.1蛋白酶

1.2.2碳水化合物酶

1.3研究内容

1.3.1有关酶性质方面的研究

1.3.2外源性因子对消化酶的影响

1.3.3内源性因子对蛋白酶的影响

1.4酶原假说

1.5展望

第二章中国明对虾幼体及仔虾蛋白质、核酸含量及消化酶活性的研究

2.1材料和方法

2.1.1实验对虾

2.1.2样品制备

2.1.3酶活力测定

2.1.4水分含量及干重的测定

2.1.5蛋白质含量的测定

2.1.6核酸含量测定

2.1.7数据的统计分析

2.2.结果

2.2.1丝氨酸蛋白酶抑制剂的作用

2.2.2各发育期消化酶活力的变化

2.2.3各期幼体及仔虾干重、水分和蛋白质含量的变化

2.2.4各发育期核酸含量的变化

2.3讨论

2.3.1对虾幼体及仔虾胰蛋白酶和糜蛋白酶的检测和表示方法

2.3.2中国明对虾幼体消化酶的个体发育变化

2.3.3饵料对个体发育中消化酶活力的影响

2.3.4对虾幼体和仔虾个体发育中水分、核酸含量变化及其与生长和消化酶活力之间的关系

第三章中草药对三种对虾幼体和仔虾消化酶活力、生长和存活力的影响

3.1材料和方法

3.1.1实验对虾

3.1.2中草药的制备及饵料强化

3.1.3粗酶液制备

3.1.4酶活力测定

3.1.5存活率及干重的测定

3.1.6数据的统计分析

3.2结果

3.2.1中草药生物包膜对对虾幼体及仔虾生长和存活的影响

3.2.2中草药生物包膜对对虾幼体消化酶的影响

3.3讨论

3.3.1中草药生物包膜的制备问题

3.3.2中草药生物包膜在对虾幼体及仔虾生长和存活率作用

3.3.3中草药生物包膜在对虾幼体及仔虾消化酶方面的作用

第四章凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾中肠腺组织学和超微结构的研究

4.1材料和方法

4.1.1生物样品

4.1.2石蜡切片制备

4.1.3冷冻切片及组化样品制备

4.1.4扫描电镜样品制备

4.1.5透射电镜样品制备

4.2结果

4.2.1扫描电镜观察

4.2.2组织学观察

4.2.3组织化学

4.2.4透射电镜观察

4.3讨论

附图版Ⅰ

第五章中国明对虾、凡纳滨对虾和日本囊对虾幼体、仔虾中肠组织学和超微结构的比较

5.1材料和方法

5.1.1对虾样品

5.1.2活体观察

5.1.3组织学样品制备

5.1.4透射电镜样品制备

5.1.5数据处理

5.2结果

5.2.1活体观察

5.2.2组织学观察

5.2.3超微结构观察

5.3讨论

5.3.1对虾个体发育中的中肠等名称的使用

5.3.2中肠发育过程中的结构变化与生理活动的关系

图版Ⅱ

图版Ⅲ

图版Ⅳ

参考文献

附录(实验方法)

硕士期间发表论文

致谢