表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护作用

摘要

该研究以MDV gI为研究对象,以鸡痘病毒(FPV)中国株为载体,构建表达MDV gI基因的重组鸡痘病毒(rFPV),在构建成功表达MDV gI的rFPV的基础上,进一步分析rFPV-gI的稳定性及鸡对rFPV-gI的抗体反应性,然后研究它的免疫保护效力,为研制rFPV-MDV-gI基因工程疫苗,进一步开发多价MDV基因工程重组疫苗奠定基础.根据MDV 648A株病毒基因组gI基因序列,我们设计了两个引物,用PCR扩增出MDV gI基因.通过琼脂糖凝胶电泳,获得一条1060 bp DNA条带,与MDV gI基因的大小是一致.在此基础上,用Qiagen公司胶回收试剂盒来纯化PCR产物.结果显示,rFPV感染的CEF有很强的荧光,而FPV(wt)感染的CEF没有荧光.说明MDV gI得到表达,此表达MDV gI基因rFPV命名为rFPV-MDV 648gI.用rFPV-MDV648gI感染CEF,传代20次后,此rFPV仍然能够在CEF上稳定复制.用10<'4>PFU rFPV-MDV648gI及FPV(wt)分别接种1日龄SFP鸡,饲养于带正压过滤空气隔离器中,接种前及接种后20天采血收集血清,用间接免疫荧光法(IFA)分析血清与感染MDV的CEF反应情况.结果表明接种FPV-MDV648gI后鸡血清中含有抗gI抗体.此结果表明表达MDVgI基因的rFPV有一定程度的抗超强毒株免疫保护力.该研究是国内外首次报导构建表达MDV gI基因重组FPV,首次证实rFPV-MDVgI具有一定程度的抗超强毒株免疫保护力.

目录

中文文摘

英文文摘

符号说明

综述一马立克氏病毒蛋白及疫苗研究进展

一、 MDV蛋白

（一）转录调节蛋白

（二）MDV编码的酶

（三）结构蛋白

（四）MDV特异性蛋白

（五）其他蛋白

二、抗MDV疫苗

参考文献

综述二疱疹病毒糖蛋白Ⅰ的研究进展

一、 gI基因及蛋白的结构

二、 FC受体活性

三、 gI在疱疹病毒囊膜形成中的作用

四、 gI在病毒传播及毒力介导中的作用

五、 gI在疫苗保护性免疫中的作用

六、 MDV gI的研究进展

参考文献

第一章表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的构建

1.材料和方法

2.结果

3.讨论

参考文献

第二章表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的免疫原性及稳定性

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第三章表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的免疫保护作用

1.材料与方法

2结果

3.讨论

参考文献

附录一常用配方

附录二转移质粒pFCfgI1175-1中gI基因原始基因测序图（第95页-第98页）

致谢

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