噬菌体展示日本血吸虫SSj14单抗的模拟表位及免疫保护性研究

摘要

本文采用日本血吸虫保护性单抗ssj14从噬菌体随机十二肽库中筛选日本血吸虫(schistosomajaponicum，sj)的保护性模拟抗原表位，并研究其在日本血吸虫保护性免疫预防中的作用及机理。选取3个具有免疫活性的噬菌体克隆及富集后的混合噬菌体，按1.5×1011pfu/鼠的剂量与弗氏佐剂混合，在0，2，4周，皮下注射免疫BALB/c鼠，以原始肽库和TBS为对照组。于末次免疫后两周，按40±1条/鼠腹部贴片感染日本血吸虫尾蚴。攻击感染42天后剖杀所有小鼠，计数获检虫体数和虫卵数，计算各组减虫率和减卵率。 研究结果：三轮筛选后，阳性噬菌体得到有效富集，直接ELISA检测到阳性克隆率为90﹪；对30个随机阳性噬菌体克隆进行测序，得到11种多肽序列，其中阳性混合噬菌体的免疫抑制率最高，可达67.03﹪；混合噬菌体免疫组IL-12平均浓度为30.34pg/ml，显著高于对照组(P＜0.01)。以IL-12为佐剂的多肽疫苗和弗氏佐剂多肽疫苗免疫小鼠后，分别得到20.0﹪和13.6﹪的肝减卵率。SEA-ELISA法检测阴阳性血清，符合率均为100﹪。

目录

论文说明：符号说明

摘要

引言

第一部分从噬菌体随机肽库中筛选与ssi14单抗结合的多肽

摘要

1材料

2方法

3结果

四讨论

第二部分噬菌体模拟表位疫苗的动物免疫保护性实验及IL-12水平检测

摘要

1材料方法

3结果

4讨论

第三部分合成多肽免疫动物免疫保护性实验

摘要

1材料

2方法

3实验结果

4讨论

第四部分合成多肽应用于血吸虫病诊断的初步探索

摘要

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

附录1氨基酸缩写一览表

附录2试剂配方

致谢

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