血型Ii单克隆抗体的研制及羊抗鼠二抗的制备

摘要

Ii血型系统是第27个红细胞血型系统。它们没有自己的编码基因，i、I抗原分别由线性和分支型多聚N-乙酰半乳糖胺决定，因此其抗原决定簇为糖分子。新生儿脐血红细胞携带i抗原，随着生长发育，β-1,6-N-乙酰半乳糖胺转移酶活性的出现将2个N-乙酰基乳糖胺(N-AC)分别加到i抗原的线性多聚N-乙酰半乳糖胺结构的3和6位，从而使直链i抗原转变为分支型I抗原。 本研究选用脐血红细胞做免疫原，用i(+)和i(-)红细胞进行筛选，得到三株抗i单克隆抗体。通过纯化i单克隆抗体(IgG)作为免疫原，获得了抗i的羊抗鼠二抗。抗i单克隆抗体及其二抗的研制为检测稀有血型ii，提供了必备的检测试剂。 通过RT-PCR的方法成功地从胎盘组织中克隆了β-1,6-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因(IgnTc)，并构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-IgnTc。重组质粒转染CHO细胞，使IgnTc在CHO细胞中的成功表达。IgnTc活性的出现将CHO细胞表面的i抗原转变为I抗原，获得了I阳性的CHO细胞株，为筛选抗I单克隆抗体及临床鉴定血清中相关I抗体的提供了重要的工具。 本研究的实施将进一步确保输血安全，给输血患者带来福音，还将为在中国开展稀有血型的检测、普查工作，建立稀有血型库奠定基础。

目录

文摘

英文文摘

符号说明

文献综述

第一部分血型i抗原单克隆抗体的研制

第二部分羊抗鼠二抗的获得

第三部分血型I抗原单克隆抗体的研制

参考文献

致 谢