不同碳源对山羊瘤胃发酵和微生物氨基酸组成影响的研究

摘要

本研究以4头安装永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊羯羊为试验动物，采用体外发酵试验研究不同碳源，即乙酸/丙酸比例为O:100、30:70、50:50、70:30、100:0，非结构性碳水化合物(NSC)/结构性碳水化合物(SC)比例为0.33、0.63、1.17、2.18，对瘤胃液体外发酵特性及瘤胃微生物区系变化的影响；通过4×4拉丁方设计，研究了饲喂稻草和配合精料组成的4种NSC/SC日粮对山羊瘤胃发酵及微生物氨基酸组成的影响；采用PCR-SSCP技术，研究不同碳源对瘤胃微生物种群区系变化的影响。研究结果表明： 1.体外培养不同比例的乙酸/丙酸底物对瘤胃液体外发酵影响显著，乙酸/丙酸为50:50组pH平均值显著高于0:100、30:70组(P<0.05)。30:70组NH3-N浓度极显著高于50:50、70:30、100:0组(P<0.01)。随着乙酸/丙酸比例的增加，瘤胃微生物产量增加，当乙酸/丙酸比例在50:50时，P、B的AA-N含量和P/B的比值都达到最高，AA-N/T-N最低。 2.不同NSC/SC比例底物引起瘤胃微生物的发酵环境的变化。pH平均值随着NSC/SC比例的增加而下降。从NSC/SC为0.63组到2.18组NH3-N浓度升高。0.33组乙酸摩尔浓度最高，1.17组最低。乙酸的摩尔百分比随底物中NSC/SC的升高而降低。1.17组丙酸摩尔浓度最低，2.18组最高；丙酸的摩尔百分比从0.63组开始随底物中NSC/SC的升高而升高，0.63组、2.18组间丁酸的摩尔浓度差异显著；乙丙比接近3:l。随着NSC/SC比例的增加，微生物产量降低；P/B从0.63组开始随NSC/SC升高而下降；原虫中AA-N占总N的比例随NSC/SC的增加而增加。不同碳源，瘤胃微生物AA-N含量不同。 3.饲喂山羊不同NSC/SC比例的日粮，随着NSC/SC的升高，瘤胃pH值降低，NH3-N浓度升高，乙酸的摩尔百分比和乙酸/丙酸的比值随日粮中NSC/SC的升高而降低，0.33组的乙酸摩尔浓度极显著高于1.17组和2.18组(P<0.01)；丙酸的摩尔百分比随日粮中NSC/SC的升高而升高，0.33组极显著低于1.17组和2.18组(P<0.01)；丁酸摩尔浓度从0.33组到1.17组呈上升趋势，在2.18组有所下降。不同NSC/SC的日粮下的细菌氨基酸含量中，天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸含量都存在显著或极显著差异。NSC/SC的变化对原虫氨基酸中天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、脯氨酸产生了显著影响，对其余的氨基酸组成变化影响不显著。不同碳源，瘤胃微生物AA组成不同。 4.采用PCR-SSCP方法，从分子生物学角度分析不同碳源对瘤胃微生物种群区系变化，各组SSCP图谱不同，相似性指数各有差异，且各组优势条带和特有条带不同。乙酸/丙酸为30:70组和50:50组的细菌SSCP图谱相似。不同NSC/SC日粮下的SSCP图谱也不同，细菌图谱的0.33组条带数最少，随着NSC/SC比例的升高，NSC/SC比为0.63组、1.17组条带数明显增加，0.63组条带数最多。不同碳源，瘤胃微生物种群区系变化不同。

目录

文摘

英文文摘

声明

文献综述

1碳水化合物对瘤胃微生物的重要作用

1.1碳水化合物的分类

1.2碳水化合物结构对瘤胃微生物的作用

1.3瘤胃微生物对挥发性脂肪酸（VFA）的利用

2瘤胃微生物的氨基酸代谢

2.1蛋白质的降解

2.2肽的降解

2.3氨基酸的降解

2.4尿素的降解

3瘤胃微生物的氨基酸需要

3.1瘤胃细菌

3.2瘤胃原虫

3.3瘤胃真菌

4瘤胃微生物的氨基酸组成

5 16S rRNA/DNA序列和PCR-SSCP分析技术在微生物研究中的应用

5.1基于16S rRNA/DNA序列的研究

5.2基于rRNA序列间隔区的研究

5.3 DNA指纹技术与瘤胃微生物多样性分析

试验部分

第一章不同碳源对瘤胃微生物体外发酵的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4小结

第二章不同碳水化合物结构的日粮对山羊瘤胃微生物氨基酸组成的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4小结

第三章不同碳源对山羊瘤胃微生物多样性的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4小结

总体讨论和研究展望

结论

参考文献

致谢

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