血管活性肠肽(VIP)对CIA大鼠的免疫调节涉及NF-κB表达和活性

摘要

目的：研究血管活性肠肽(Vasoactive Intestinal Peptide，VIP)对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis，CIA)大鼠体外的免疫调节作用和NF-κB表达及活化之间的关系，为探索VIP治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)提供实验依据。
　　 方法：取已成模大鼠的滑膜成纤维细胞，在体外培养的条件下加入VIP及其受体拮抗剂干预，采用MTS法检测其对细胞增殖的影响，采用流式细胞术及DNA片段化分析测定细胞凋亡率。构建荧光素酶报告基因表达载体pGL2promoter-NF-κB，用磷酸钙-DNA共沉淀法瞬时转染入CIA成模大鼠体外培养的滑膜细胞中，用化学发光法检测VIP及其受体拮抗剂干预处理后NF-κB活性的变化；采用免疫印迹(Western blot)法检测VIP及其受体拮抗剂处理对CIA成模大鼠体外培养的滑膜细胞中NF-κB表达量的影响。
　　 结果：10-10mol/LVIP可显著抑制LPS刺激后CIA成模大鼠滑膜细胞增殖，促进其凋亡率增加10％以上；同时还可降低CIA成模大鼠滑膜成纤维细胞中NF-κB的活性和表达，加入其受体拮抗剂对上述过程均有逆转作用。
　　 结论：VIP可通过受体依赖途径对CIA成模大鼠滑膜细胞产生抑制增殖、促进凋亡的作用，而这一作用的分子机制之一可能是通过受体依赖途径下调滑膜成纤维细胞NF-κB的表达和活化，这样可以影响各种炎性因子表达，起到治疗CIA成模大鼠的作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

第一章文献综述

1.交感-副交感神经系统

2.下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)

3.泌乳素(Prolacin，PRL)

4.下丘脑-垂体-性腺轴

5.RA相关的神经肽

结语

参考文献

第二章血管活性肠肽(VIP)对CIA大鼠的免疫调节涉及NF-κB表达和活性

1.材料与方法

1.1材料

1.2实验方法

1.3统计学分析

2.结 果

2.1 VIP可抑制体外培养的CIA成模大鼠滑膜细胞的增殖

2.2 VIP可促进体外培养的CIA成模大鼠滑膜细胞的凋亡

2.3构建质粒鉴定

2.4化学发光法检测NF-κB的活性

2.5 VIP可减少CIA鼠滑膜成纤维细胞中NF-κB的表达

3.小结与讨论

参考文献

致 谢

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