文摘
英文文摘
缩略词表
第一章 绪论
1.1 溶菌酶的研究进展
1.1.1 溶菌酶的分类
1.1.2 溶菌酶的催化作用
1.2 溶菌酶的生物学功能
1.2.1 溶菌酶在身体防御机制方面的作用
1.2.2 溶菌酶与其它生物活性酶的联系
1.2.3 溶菌酶与免疫促进物质的联系
1.2.4 溶菌酶的消化作用
1.3 溶菌酶的应用
1.3.1 溶菌酶在食品工业中的应用
1.3.2 溶菌酶在医学上的应用
1.3.3 溶菌酶在多种疾病诊断方面的应用
1.3.4 溶菌酶在基因工程和酶工程上的应用
1.3.5 制备细胞浸提物
1.3.6 溶菌酶在降解壳聚糖上的应用
1.3.7 溶菌酶在饲料中的应用
1.4 溶菌酶与棘皮动物的防御机制
1.5 海洋生物溶菌酶研究动态
1.5.1 i型溶菌酶分子水平研究
1.5.2 海洋生物溶菌酶基因工程的研究
1.5.3 双功能的i型溶菌酶-Destabilase-lysozyme
1.6 本文的主要研究内容
第二章 材料与方法
2.1 海参溶菌酶基因的克隆
2.1.1 材料与试剂
2.1.2 方法与步骤
2.2 海参溶菌酶基因的southern和northern杂交
2.2.1 材料与试剂
2.2.2 方法
2.3 用生物信息学方法对海参溶菌酶基因序列特征进行分析
第三章 结果与分析
3.1 海参肠总RNA和基因组DNA的质量分析
3.1.1 总RNA的质量分析
3.1.2 基因组DNA的质量分析
3.2 海参溶菌酶基因克隆
3.2.1 海参溶菌酶基因cDNA的克隆
3.2.2 海参溶菌酶基因全长DNA的克隆
3.3 海参溶菌酶基因序列分析
3.3.1 海参溶菌酶基因保守区域cDNA片段的序列分析
3.3.2 海参溶菌酶基因cDNA全长序列的分析
3.3.3 海参溶菌酶基因内含子分析
3.3.4 同源性比较和分子发育分析
3.3.5 海参i型溶菌酶三级结构模型
3.4 Southern杂交结果与分析
3.4.1 海参基因组DNA的提取
3.4.2 酶切结果分析
3.4.3 Southern杂交检测溶菌酶基因的拷贝数
3.5 Northern杂交结果与分析
3.5.1 DIG-PCR扩增标记探针的检测
3.5.2 RNA变性凝胶电泳分析
3.5.3 Northern杂交对海参溶菌酶基因表达量的检测
第四章 讨论
结论
参考文献
致谢
附录