家兔青光眼模型的建立及葛根素隐形眼镜对青光眼的疗效观察

摘要

药物治疗青光眼是通过减少房水生成和疏通房水排出径路达到降眼内压的目的，以抑制病情的发展。传统点眼给药方式有药物作用时间短和频繁用药的缺点。为了探索青光眼的简便有效疗法，本试验首先用不同的材料建立兔青光眼模型，通过临床和组织学观察确定建立青光眼模型的适宜方法，然后采用配戴葛根素隐形眼镜、葛根素点眼和毛果芸香碱点眼三种用药方法分别对青光眼动物模型进行治疗，通过观察兔眼表层的临床表现以及前房角的组织学变化对不同用药方法的临床疗效进行评价。
　　(1)家兔青光眼动物模型的建立:首先选取无眼部疾病的健康兔20只，随机分为4组(n=5)，分别采用甲基纤维素M20、甲基纤维素M450、甲基纤维素MCH和复方卡波姆C940四种材料建立青光眼模型，在术后2h、4h、8h、12h、24h、48h、96h、192h和384h测定眼内压;在3d、6d、12d和18d时对角膜混浊度、血管新生情况进行评分;第18d对试验兔进行安乐死，摘取眼球进行病理组织学观察。试验结果如下:
　　术后4组兔的眼内压均明显高于术前，并且角膜出现不同程度的水肿、混浊，角巩膜充血等并发症。其中，M20组和M450组的并发症相对较轻，持续时间较短，眼内压分别在术后4h和8h降至正常水平;MCH组和C940组的并发症病情严重，持续时间长，与M20组和M450组比较，多项指标差异极显著（P＜0.01），并在角膜表面出现新生血管;C940组的病变程度重于MCH组，第3d角膜表面出现黄豆粒大小的水泡，第18d时新生血管延伸至角膜中央，形成较粗的血管翳。
　　兔眼前房角处组织切片HE染色镜检，M20组与M450组前房角Schlemm管管腔有轻度狭窄;小梁网形状不规则，小梁带之间的间隙变窄;MCH组前房角Schlemm管管腔闭塞，小梁纤维化并与虹膜粘连，内皮细胞与网眼结构消失;虹膜萎缩，其基质发生纤维化;C940组前房角Schlemm管管腔闭塞，小梁严重纤维化，内皮细胞与网眼结构均消失;虹膜增厚并出现基质纤维化，与小梁广泛粘连。
　　由上述结果得知，甲基纤维素MCH建立的青光眼模型眼内压稳定，维持时间长，前房角组织结构病变符合青光眼病例的特征，与卡波姆C940相比其并发症较轻，更适用于研究慢性青光眼病理生理的过程。
　　(2)葛根素隐形眼镜对家兔青光眼动物模型的治疗试验:选择无眼部疾病的健康兔20只，右眼采用前房注射2％甲基纤维-HV0.2mL诱导青光眼模型。然后随机分为4组(n=5)，对照组佩戴未载药的隐形眼镜，PCL组佩戴载有葛根素的隐形眼镜，每天佩戴眼镜12h; Pue组和Pilo组分别用葛根素与毛果芸香碱滴眼液点眼，每日2次，每次相隔6h。于第0d、7d、14d、21d、28d和35d记录眼内压以及观察角膜混浊度和血管新生情况，并进行评分;于第35d对试验兔进行安乐死，摘取眼球进行病理组织学观察。试验结果如下:
　　因对照组兔眼内压持续上升，在第21d时对照组眼内压极显著高于PCL组和Pilo组(P＜0.01)，显著高于Pue组（P＜0.05），在第28～35d时对照组眼内压极显著高于用药组（P＜0.01）;PCL组、Pue组和Pilo组的兔眼内压分别在第7d、21d和14d时下降至正常范围，3组相比均无显著性差异。对照组在第7～35d时角膜混浊度逐渐加重，新生血管延伸至角膜中央;PCL组用药后第7d新生血管停止生长并开始消退，第14d角膜混浊度逐渐减轻，第35d时角膜混浊与角膜新生血管评分均极显著低于术前(P＜0.01); PCL组和Pilo组在用药后兔眼表层结构的病理变化基本相似，与Pue组的差异不显著。
　　兔眼前房角处组织切片HE染色镜检查，对照组Schelmm管闭塞，小梁网组织纤维化并与虹膜广泛粘连，网眼结构消失，部分内皮细胞脱落;虹膜增厚并纤维化;PCL组前房角schlemm管狭窄，管腔内有炎性细胞浸润，小梁网间隙变宽，其间有炎性细胞浸润;Pue组前房角schelmm管管腔狭窄，内有炎性细胞浸润，小梁网狭窄及纤维化，部分小梁板断裂融合;Pilo组前房角schelmm管管腔狭窄，小梁网部分仍纤维化，其管腔扩张，并有炎性细胞浸润。
　　综合以上试验观察结果可知，葛根素隐形眼镜可有效降低青光眼家兔的眼内压，抑制炎症反应和血管新生;与葛根素滴眼液比较，降低青光眼模型眼内压的效果明显升高，但对其并发症的治疗无显著性差异。

目录

摘要

符号说明

第一部分 文献综述

1 青光眼的病因

1．1 正常眼房水排出的通道

1．2 各型青光眼的病因

2 青光眼的诊治

2．1 青光眼的临床检查方法

2．2 青光眼的治疗方法

3 青光眼动物模型的制作

3．1 α-糜蛋白酶法

3．2 甲基纤维素法

3．3 激光诱导法

3．4 皮质类固醇法

3．5 复方卡波姆法

4 葛根素的药理作用和在眼科疾病中应用

4．1 葛根素药理作用

4．2 葛根素在治疗青光眼中的应用

5 医用药物控制释放性高分子载体材料

5．1 壳聚糖

5．2 β-环糊精

5．3 胶原

6 角膜接触镜

6．1 角膜接触镜材料的应用

6．2 角膜接触镜材料的性能要求

参考文献

第二部分 试验研究

试验一 四种材料建立家兔青光眼模型的临床与组织学观察

1 材料

2 方法

3 数据的统计分析

4 结果

5 讨论

参考文献

试验二 葛根素隐形眼镜治疗家兔青光眼的效果观察

1 材料

2 方法

3 数据的统计分析

4 结果

5 讨论

全文总结

参考文献

致谢

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